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编号:39322
羊奶源产细菌素乳酸菌筛选、鉴定及益生特性研究
http://www.100md.com 2021年12月17日 2021年第11期
单增,李斯特,球菌,1材料与方法,1试验菌株,2培养基与试剂,3主要仪器与设备,4试验方法,2结果与分析,1产细菌素乳酸菌的筛选,2乳酸菌的抑菌稳定性测定,3产细菌素的乳酸菌的鉴定结果,4产细菌素乳酸菌基因组重复序
     杨珍珠,潘秭琪,迟 海*,陶乐仁

    (1 上海理工大学健康科学与工程学院 上海200093 2 中国水产科学研究院东海水产研究所 上海200090 3 大连海洋大学食品科学与工程学院 辽宁大连116023)

    益生菌是一类具有改善宿主新陈代谢,增强免疫力,调节肠道菌群作用的活体微生物,当宿主摄入一定量益生菌时可以对宿主发挥有益作用[1]。由于乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)被普遍认定为安全的微生物,同时其具有在低pH 值条件下存活、黏附能力强、产抑菌物质等特性,因此大多数乳酸菌常被看作益生菌[2]。其中,嗜热球菌、乳球菌、肠球菌、乳杆菌等都是当前研究较广、商业化集中的菌种[3-6]。

    乳酸菌在生长过程中会产生许多抑菌物质,其中由乳酸菌核糖体合成产生的一类抑菌肽,命名为细菌素,对其亲缘较近的细菌有高效的抑制作用。也有部分细菌素具有广谱抑菌活性,可抑制食品腐败菌和致病菌[7]。与其它抑菌物质不同,细菌素的抑菌作用具有特异性,对它的靶细菌具有高效的杀灭作用[8]。此外,细菌素具有热和酸碱耐受,在体内易降解、安全、无残留的特点[9]。筛选产细菌素的乳酸菌,分析其潜在的益生特性,对于预防和治疗某些特定致病菌引起的肠道疾病具有重大的意义。

    本研究以羊奶源中提取乳酸菌为指标菌,以3 种常见的食源性致病菌【单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)】为指示菌,筛选具有抑制上述食源性致病菌活性的乳酸菌,并对其进行分子、生化等特性分析。同时,通过模拟胃肠液的耐受性、聚集性试验,探讨羊奶源中筛选出的乳酸菌的益生特性,旨在对产细菌素的乳酸菌的益生性能进行评价,为微生态制剂开发提供基础数据。

    1 材料与方法

    1.1 试验菌株

    单增李斯特菌LFM2813、金黄色葡萄球菌LFM3263、蜡样芽孢杆菌LFM2805、乳酸乳球菌LFM2122(Lactococcus lactisLFM2122)、大肠埃希氏菌LFM3704(Escherichia coliLFM3704),由中国水产科学研究院东海水产研究所保存。

    1.2 培养基与试剂

    鲜羊奶购于陕西渭南;脑心浸液培养基(Brain Heart Infusion,BHI),美国BD 公司;MRS 培养基、兔血清平板,北京陆桥技术有限责任公司;M17 培养基,青岛高科园海博生物技术有限公司 ......

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