李明亮，严建刚，朱 艳，魏 颖*，蔡木易，谷瑞增

    (1 中国食品发酵工业研究院 北京市蛋白质功能肽工程技术研究中心 北京100015 2 完美(广东)日用品有限公司 广东中山528451)

    乳清蛋白是牛乳中酪蛋白沉淀分离时保留在上清中的多种蛋白组分的统称[1]。独特的氨基酸序列和三维结构使其具有广泛的功能特性[2]。乳清蛋白主要成分为β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白、糖巨肽、乳铁蛋白、乳过氧化酶等[3]，富含支链氨基酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、精氨酸和谷氨酰胺[4-5]，具有抗癌、抗氧化、抗菌、抗病毒、降血脂、调节免疫等作用[6]。大量体外研究证实乳清蛋白可促进益生菌增殖[7]。

    豌豆(Pisum sativumLinn)是我国重要的农作物之一，其蛋白含量在23%～25%，氨基酸组成平衡[8]，且富含豆类中较为缺乏的赖氨酸[9]。目前对豌豆蛋白功能特性的研究报道较少[10]，有研究显示豌豆蛋白的酶解物具有促进益生菌增殖的作用[11]。

    人体肠道内寄生着大量微生物，正常情况下其种类和数量保持动态平衡，发挥着促进宿主机体发育，参与代谢，促进免疫系统成熟，拮抗致病菌定植等作用。蛋白质作为重要的营养物质对肠道健康的影响越来越受到人们关注[9]。肠道菌群可以参与机体蛋白质代谢，食物蛋白会影响肠道菌群的组成与平衡，而肠道菌群的变化影响机体对蛋白质的利用[12]。益生菌具有维持肠道菌群平衡的作用[11]。肠道菌群的调节和肠道微环境的改善，可以通过外源补充益生菌实现[13]。益生菌发挥作用必须达到足够的数量，国家标准规定添加到益生菌产品中的活菌数应不小于106CFU/g(或mL)[14]。

    肠道菌群紊乱状况在抗生素日益滥用的今天愈发严重，主要表现为有益菌数量减少和致病菌数量增多[15]。肠道菌群紊乱和多样性降低将导致宿主代谢紊乱，免疫系统受到影响，进而威胁宿主健康[16-17]。为了探究乳清蛋白和豌豆蛋白以及蛋白和益生菌联合作用对抗生素导致的肠道菌群紊乱的调节作用，本试验通过灌胃盐酸林可霉素建立肠道菌群紊乱小鼠模型，对模型小鼠进行蛋白样品及蛋白与益生菌联合干预处理。干预结束后对小鼠盲肠内容物进行菌群计数，评价小鼠肠道微生物的定植抗力，对小鼠粪便中细菌基因组DNA进行16S rDNA 测序，研究不同样品的干预对肠道菌群紊乱小鼠的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    乳清蛋白、豌豆蛋白、豌豆适度水解蛋白肽、益生菌粉，由北京中食海氏生物技术有限公司(SEA SON)提供 ......