熊 煜， 张凤丽， 刘 斌，2， 赵立娜*

    (1 福建农林大学 国家菌草工程技术研究中心 福州350002 2 福建农林大学食品科学学院 福州350002)

    原发性骨质疏松症从病因学分为绝经后骨质疏松症(Postmenopausal osteoporosis， PMOP)(Ⅰ型)和老年性骨质疏松症(Ⅱ型)[1]。 绝经后骨质疏松通过去势法等被国内外学者广泛研究[2-3]。 由于老年性骨质疏松症(SOP)是生物衰老在骨骼方面的一种特殊表现， 且复制SOP 动物模型的周期长，死亡率较高，因此研究SOP 较困难。 目前，D-半乳糖致雄性鼠骨质疏松动物模型是研究SOP的一个重要工具， 具有简便易行、 价格低廉的特点。 大量D-半乳糖可致睾丸功能减退，雄激素水平降低，这与衰老致性腺功能退化相似[4]。

    灰树花是担子菌亚门的一种药食两用珍稀菇类，因含有丰富的多糖、蛋白质及微量元素等活性物质，已成为亚洲流行的食用菌。其蛋白质含量高达31.5%，必需氨基酸在总氨基酸中占比高达45.5%，远高于香菇、银耳、金针菇、黑木耳等常见食用菌[5]。 灰树花多肽具有抗氧化、抗菌、免疫调节、降血脂和降血糖等活性。 钙是人体必需的一种重要矿质元素，能有效防治骨质疏松[6]，而日常膳食并不能满足机体每日需求量。 中国现有膳食结构的营养调查表明，我国居民钙摄入量普遍偏低，仅达钙推荐供给量(RDA)的50%左右[7]。我国市场流通钙制剂约2 700 种， 然而普遍存在生物利用度低的现象[8]。 生物活性肽具有钙元素载体的作用，可输送钙元素到人体各处，充分发挥其功能[9]。 肽与钙离子螯合形成的肽钙螯合物， 能够通过肠道对小分子肽段的吸收机制以螯合物的形式被小肠主动吸收，不易形成磷酸钙沉积物，能提高钙的生物利用度，具有双重营养功能，是一种理想的补钙制剂[10]。Bao 等[11]、张根生等[12]证明多肽钙制剂能够有效预防大鼠骨质疏松症。本文通过腹腔注射D-半乳糖建立衰老性骨质疏松大鼠模型， 结合体外Caco-2 细胞试验， 探讨灰树花多肽-钙螯合物对衰老性骨质疏松症的影响。

    1 材料与方法

    1.1 动物与细胞

    SPF 级成年雄性ICR 小鼠50 只，每只体质量(45±5)g， 由吴氏实验动物中心提供。 许可证号：SCXK(沪)2017-0005。 Caco-2 细胞，由福州大学生物工程研究所提供。

    1.2 主要试剂及仪器

    灰树花，庆元县宏亿农业发展有限公司；无水乙醇、氢氧化钠(NaOH)、HCL、无水氯化钙 ......