超声波辅助提取骆驼皮胶原蛋白的工艺及结构表征
酰胺,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1不同质量浓度的中性蛋白酶(1398)对去毛效果的影响,2超声波辅助提取骆驼皮胶原蛋白的单因素实验,3响应曲面法对超声波辅助提取骆驼皮胶原蛋白工
史 睿, 何 静, 吉日木图,2*(1 内蒙古农业大学 乳品生物技术与工程教育部重点实验室 呼和浩特010018 2 内蒙古骆驼研究院 内蒙古阿拉善750306)
胶原蛋白是动物体内丰富的蛋白质之一,在所有脊椎动物和无脊椎动物的细胞外基质中起着关键作用,其自身组装成横纹原纤维,为细胞生长提供支持,并影响结缔组织的机械弹性[1-2]。胶原蛋白主要存在于动物的皮、骨、软骨及肌腱等结缔组织中,约占动物总蛋白的30%[3]。 它被广泛用于食品、化妆品(皮肤植入物)、生物医学及细胞培养等多个领域[1,4-7]。胶原蛋白作为一种安全的有效成分应用于产品加工中, 可以从肉类加工行业的原材料中有效回收[8]。
内蒙古自地区拥有丰富的骆驼资源, 然而牧区交通不便且条件有限,牧民屠宰骆驼后,只注重食肉, 许多骆驼皮被弃置, 未能充分发挥皮张价值。 研究表明,骆驼皮的脂腺远不如猪皮发达,也比牛皮弱,骆驼皮中油脂含量低于猪皮、牛皮[9],可将骆驼皮作为提取胶原蛋白的优质原料。通常,将富含胶原纤维的皮肤或肌腱等组织通过中性盐、酸、碱和蛋白酶处理来提取胶原蛋白,相比之下,在0.5 mol/L 乙酸中使用胃蛋白酶提取胶原蛋白可以获得更高的产量。 虽然在酶的作用下胶原蛋白的端肽被水解切割, 但是其三螺旋结构基本保持完整[10-11]。 这些常规的提取方法效率不高,且在提取过程中会造成大量的胶原组织残留物[12]。 目前,低强度的超声波作为一种非破坏性[13]、安全高效的辅助提取方式被广泛应用在食品加工、 蛋白质等物质的提取及改性中[14]。 本试验通过低强度超声波辅助的方式,从骆驼皮中提取胶原蛋白,促进骆驼源胶原蛋白的工业化生产, 增加骆驼副产品的附加值。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
骆驼皮,内蒙古骆驼研究院。
胃蛋白酶(1∶10 000),北京索莱宝科技有限公司;中性蛋白酶(1398),山东龙元生物工程有限公司;羟脯胺酸(碱水法)试剂盒,南京建成生物工程研究所;其它主要试剂均为分析纯级。
1.2 仪器与设备
JY 88-IIN 超声波细胞粉碎机,宁波新芝生物科技股份有限公司;JJ-2 型组织捣碎机,常州赛普实验仪器厂;XK78-2 型磁力加热搅拌器, 江苏新康医疗器械有限公司;LAMBDA 365 紫外-可见分光光度计,PerkinElmer 股份有限公司;Thermo Scientific Nicolet iS10 傅里叶变换红外光谱仪,赛默飞世尔科技公司;TM4000 台式扫描电子显微镜 ......
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