王丽红，杨 辉，耿涌喆，苏 文，孔 阳

    (陕西科技大学食品与生物工程学院 西安 710021)

    纳米硒(SeNPs)具有抗氧化，调节免疫，促进生长，抗癌、抗菌等药理作用，是一种新型的补硒形态[1-4]。微生物可通过同化还原、异化还原和生物群落甲基化等作用，将水体、底泥、土壤等环境中无机硒还原成SeNPs，积累在细胞内或分泌在胞外[5]。微生物对纳米硒的转化具有普遍性，细菌、真菌、放线菌、原生动物均能转化合成SeNPs[6]，而且微生物合成的纳米硒颗粒较物理、化学法合成的稳定、分散性好[7-8]，具有成本低、毒性小、生物利用度高等独特优势。乳酸菌是一类可以调节生物体肠道内菌群生态平衡，对宿主消化、抗病、抗衰老等有促进作用的微生物菌群，目前报道的可以转化合成SeNPs 的有动物双歧杆菌[9]、保加利亚乳杆菌[10]、乳酸乳球菌[11]、干酪乳杆菌[12]、嗜酸乳杆菌[13]等。课题组前期研究分离到一株植物乳杆菌，对亚硒酸钠耐受能力强、SeNPs 转化率高，具有重要的应用价值。

    植物乳杆菌在生长过程中需要的营养基质较复杂，一般采用的配方有MRS、M17、MC 等，在不同营养基质中植物乳杆菌生长良好，并能将亚硒酸钠还原成SeNPs。试验研究发现，常用的植物乳杆菌营养基质对纳米硒具有一定的还原性，在无植物乳杆菌生长繁殖的情况下也可将亚硒酸钠转化合成SeNPs，对微生物还原合成纳米硒有较大的干扰作用。目前有关常用营养基质对微生物合成纳米硒的干扰情况还未见研究报道。本文通过研究合成培养基不同组分对亚硒酸钠的还原情况，确定影响植物乳杆菌合成纳米硒的主要成分，并进一步采用改良培养基质及菌体洗涤处理的方式，避免营养基质对植物乳杆菌合成纳米硒的影响。本研究结果将为微生物合成纳米硒及富硒菌的筛选及应用提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 菌种

    植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)由陕西科技大学1C415 实验室分离保藏并鉴定。

    1.2 培养基和试剂

    MRS 肉汤：葡萄糖20.0 g、牛肉膏5.0 g、硫酸锰0.05 g、蛋白胨10.0 g、乙酸钠5.0 g、硫酸镁0.2 g、磷酸氢二钾2.0 g、吐温80 1 mL、柠檬酸三铵2.0 g、酵母菌粉4.0 g、蒸馏水1 000 mL，分装后121 ℃高压灭菌20 min。

    M17：酵母抽提液5.0 g、乳糖20.0 g、牛肉膏10.0 g、葡萄糖2.0 g、磷酸氢二钾2.0 g、吐温80 1 mL、乙酸钠5.0 g、蒸馏水1 000 mL ......