郑飞洋，戴志远，2*，崔益玮，郑振霄，2，朱 凯，郭丽平

    (1 浙江工商大学海洋食品研究院 杭州 310012 2 浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室 杭州 310012)

    金枪鱼油中含有丰富的ω-3 系列多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids，PUFA)，主要包括二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，DHA)。EPA 和DHA 具有广泛的生理作用，其中EPA 作为“血管清除剂”，可以降低血脂和胆固醇，预防心血管疾病，还可以抑制血小板凝聚，防止血栓形成[1-2]。DHA 作为“脑保护剂”，有增强记忆力，改善大脑的功能，还可以促进婴幼儿大脑和视觉系统发育，提高婴儿认知能力、语言能力、眼手协调能力[3-6]。此外，EPA 和DHA 在炎症、癌症、抑郁症治疗方面也有显著效果，被广泛应用于医药和功能食品领域[7-11]。研究表明，人体中的α-亚麻酸(ALA)可通过脱氢、碳链延长反应转化为EPA 或DHA，然而参与转化的ALA 通常低于10%，不能满足人体正常所需，需要从外界摄入EPA 和DHA[12-13]。目前市场上售卖的EPA 和DHA 产品大多为甲酯或乙酯型，临床实验表明，相较前两者，甘油酯型的EPA 和DHA 更易被人体吸收转化[14-15]。

    目前，鱼油中多不饱和脂肪酸富集分离方法主要有分子蒸馏法、尿素包合法、脂肪酶法、色谱法、超临界流体萃取法等[16-20]。低温结晶法是一种有效富集多不饱和脂肪酸的方法，其原理是根据不同结构的脂肪酸在不同温度和有机溶剂中溶解度的差异进行分离[21]。该方法操作简便，设备要求低，有机试剂可回收利用且低温降低了PUFA 变性的风险，常用于富集植物油中甘油酯型PUFA或鱼油中游离型PUFA。有关低温结晶法富集鱼油中甘油酯型EPA 和DHA 报道较少。

    本文采用低温结晶法富集精制鱼油中甘油酯型EPA 和DHA，从多个方面优化富集方法，测定脂肪酸组成的变化，旨在为甘油酯型多不饱和脂肪酸的生产提供试验参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    金枪鱼油，舟山丰宇海洋生物制品有限公司；活性白土，济南建辉化工有限公司；37 种脂肪酸混标，上海安普科学仪器有限公司；十六烷酸甘油一酯标准品、十七碳烯酸甘油二酯标准品、十八碳二烯酸甘油三酯标准品，上海安普实验科技有限公司。氢氧化钠、氯化钠、无水硫酸钠、三氟化硼-甲醇、正己烷、异丙醇、乙醇、丙酮、乙腈、甲醇等均为分析纯 ......