鲁雷震，宏 丹，封成玲，贾紫伟，周景波，宁亚维，贾英民，王志新*

    (1 河北科技大学食品与生物学院 石家庄 050018 2 北京工商大学食品与健康学院 北京 100048)

    有害真菌会导致食品腐败，常见的食物腐败真菌主要包括青霉、曲霉、根霉等丝状真菌，部分菌株还会产生真菌毒素，如黄曲霉毒素、伏马毒素和脱氧雪腐镰刀菌烯醇等，对许多食品(乳制品、肉制品、烘焙食品及其衍生产品等)造成污染[1-2]。目前，应对有害真菌造成的食物腐败，使用最多的是添加化学防腐剂。随着人们生活水平的提高，对化学防腐剂的安全性有所担忧。开发安全、高效的生物源抑真菌物质成为发展的迫切需求。

    抗真菌肽是一种具有双亲性的小分子多肽，一般由10～50 个氨基酸组成，是能够抑制真菌侵害的一种多肽[3]。它可作为一种安全、高效的真菌抑制剂作用于食品防腐，并且独特的抑真菌机理也解决了其它药物导致的真菌耐药性的问题[4]。瑞典科学家Boman[5]首次从惜古天蚕中发现小分子抗菌肽，研究发现其具有抗真菌作用。此后，人们先后从不同的生物体内发现抗真菌肽，包括植物、动物和微生物，还有人工合成抗真菌肽[6]。微生物来源抗菌肽具有成本低、无残留、无毒害等优点，并且微生物是一个巨大的宝库，抗真菌肽的来源异常丰富，筛选获得具有高效、广谱抑真菌特性的微生物一直是研究者关注点。

    目前分泌抗真菌肽的菌株大多数为芽孢杆菌属微生物，包括枯草芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等。例如：于杰等[7]从海南省香蕉根部土壤中分离得到一株枯草芽孢杆菌B25，能有效抑制香蕉枯萎病镰刀菌以及其它植物病原真菌。钱英等[8]从土壤中筛选分离得到1 株解淀粉芽孢杆菌BW-13，对酿酒酵母和植物病原真菌灰霉均具显著的抑菌活性。Ji 等[9]从植物根际土壤样品中筛选得到1 株芽孢杆菌，所产抗真菌蛋白在植物病原真菌的生物防治中具有潜在应用价值。目前这些微生物及其所产抗菌肽主要用于生物防治，而用于食品防腐的较少，此外，所研究的抗真菌肽产量较低，极少人优化了发酵条件。基于此，本研究从江苏、河北土壤样品中筛选具有产抗真菌肽的菌株，优化其发酵条件，提高其发酵产量，为抗真菌肽的资源开发和工业化生产与应用提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    土壤取自河北、江苏等地；营养琼脂培养基(NA)、营养肉汤培养基(LB)、马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，北京奥博星生物技术有限公司；胰蛋白酶、胃蛋白酶、过氧化氢酶、蛋白酶K、蛋白酶E ......