即食食品中阪崎克罗诺杆菌的分离鉴定及分子分型
质谱,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1试验菌株分离鉴定结果,2MALDI-TOF-MS分析结果,3多位点序列分型分析结果,3结论与讨论
马炳存,陈学强,王 灿,刘 阳,李增婷,李琰歆,崔学文(四川省食品药品检验检测院 成都 611731)
克罗诺杆菌属(Cronobacter spp.)是肠杆菌科内一类兼性厌氧、周生鞭毛、能运动、不产芽孢、短杆状革兰氏阴性菌,2008年被定义为新属,并被分为16 个生物群(biogroups)[1]。1980年以前,因该菌产黄色素的特性,故一直被称为“产黄色素阴沟肠杆菌(yellow-pigmented Enterobacter cloacae)”。1980年Farmer 等[2]通过核酸杂交、生化试验、色素产生、药敏特性分析,将该菌从阴沟肠杆菌中分离开来,更名为阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)。2008年,Iversen 等[3-5]通过荧光标记-扩增片段长度多态性指纹图谱(f-AFLP)、DNA 杂交、16s rDNA 全序列分析方法重新对阪崎肠杆菌进行系统分类研究,结果发现这一菌种的许多菌株的鉴定结果差异较大,建议将阪崎肠杆菌定义为一个新属,即克罗诺杆菌属(Cronobacter spp.),该属包括7 个种,3 个亚种。
阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)是克罗诺杆菌属中重要的条件致病菌,主要感染早产儿、出生体重偏低等身体状况较差的新生儿及婴幼儿,引起新生儿脑膜炎、小肠结肠炎、菌血症等疾病,并可能引发严重的神经系统后遗症[6-7]。有研究表明,该菌可感染老人及免疫力低下人群[8]。婴儿配方奶粉被认为是阪崎克罗诺杆菌的主要传播媒介。许多文献[9-12]报道在奶酪、肉制品、谷物制品、香肠、冰激凌、蔬菜等即食食品中均可分离到阪崎克罗诺杆菌。目前,食品中克罗诺杆菌的最初来源还未确定,推测植物性材料是重要来源。
关于阪崎克罗诺杆菌的致病机制目前了解较少,不同菌株的毒力差异明显,采用合适的分型方法对食品中污染的阪崎克罗诺杆菌进行溯源分析,阐明其在食品中流行规律,对控制食品中阪崎克罗诺杆菌污染意义重大。多位点序列分型(Multi Locus Sequence Typing,MLST)技术简单快速,分辨率高,数据结果易于实验室间进行比对,被广泛应用于细菌分子分型研究[13-14]。截至2018年5月,克罗诺杆菌MLST 数据库(https://pubmlst.org/cronobacter/)已收录来源为食品样品、临床样品、环境样品等分离菌株1 875 株,包括602 种ST 型,为克罗诺杆菌MLST 序列比对、进化分析提供充足的数据支撑。
本文对即食食品中阪崎克罗诺杆菌分离菌株进行鉴定及分子分型 ......
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