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编号:39160
基于二维液相色谱体系分析特殊医学用途奶粉中的牛磺酸含量
http://www.100md.com 2022年4月12日 2022年第3期
水解,1材料与方法,1设备和试剂,2试验方法,3色谱条件,2结果与讨论,1DNS-CL衍生液浓度,2衍生环境pH值,3衍生反应时间,4液相条件,5方法学评价,3结论
     卞 华,翁史昱,王 亮

    (上海市质量监督检验技术研究院 上海 200233)

    牛磺酸(Taurine,C2H7NO3S,HO3S-CH2-CH2-NH2)化学名为β-氨基乙磺酸,是一种特殊的含硫非蛋白氨基酸,以游离状态分布于组织间液和细胞内液中。牛磺酸具有突出的生理药理作用,能调节机体内糖类和脂类的代谢,提高机体免疫力,维持渗透压平衡,增强细胞膜抗氧化能力等[1-3],对婴幼儿智力开发和神经系统的发育也有重要作用[4-5]。目前,牛磺酸作为一种必备的营养强化剂添加在食品中,欧美等发达国家规定在婴幼儿食品中必须添加一定量的牛磺酸。我国食品安全国家标准也规定,为了改善婴幼儿配方食品的蛋白质质量,提高其营养价值,推荐婴儿配方乳制品中添加适当牛磺酸。

    特殊医学用途配方奶粉(特医奶粉) 主要包括:部分水解、深度水解和全氨基酸水解配方奶粉,是针对过敏体质婴儿专门设计的。婴幼儿的免疫系统未完全发育,胃肠道屏障发育不成熟,牛奶蛋白对婴幼儿来说是一种异种蛋白,牛奶中的β-乳球蛋白有很强的致敏性,极易出现婴幼儿牛奶蛋白过敏,造成便血,腹胀,甚至会导致患儿出现死亡以及过敏性休克[6]。牛奶蛋白过敏的发病率为6%,已成为对婴幼儿健康成长发育产生影响的首要因素[7-8]。水解配方奶粉在加工时将牛奶中的蛋白质部分水解或者完全水解,以降低过敏概率,且不会影响蛋白质的营养,已成为大多婴幼儿食用的首选。

    特医奶粉的基质体系相对于普通婴儿配方奶粉复杂很多,蛋白质被水解后形成大量的氨基酸于基质中,对于牛磺酸的定量分析会产生很大的干扰。其中,薄层扫描法[9-10]很容易受到其余氨基酸的干扰,准确性较低;高效液相色谱——串联质谱法[11-13]虽应用广泛,但对于奶粉本身的基质效应显著,重复性不理想;高效液相色谱——紫外检测[14-16],受到牛磺酸自身紫外吸收较弱的影响,灵敏度较低。

    本文选择基质最为复杂的全氨基酸水解配方奶粉,改进前处理方法,以克服反应时间长的缺点[17],保留丹磺酰氯柱前衍生定量准确的优点,并构建二维液相系统(2D-LC)。在除去大量氨基酸的干扰后,利用荧光检测器精确测定牛磺酸含量。本试验方法,不仅解决了国家标准目前无法准确定量全氨基酸水解配方奶粉中牛磺酸含量的问题,对其余特殊医学用途奶粉和普通婴幼儿配方奶粉也同样适用。

    1 材料与方法

    1.1 设备和试剂

    DionexUltiMate 3000 系统 (双三元梯度泵),美国 Thermal Scientific;Centrifuge 5804 高速离心机 ......

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