朱文卿，朱姗姗，何秋霞，郑振佳*

    (1 山东农业大学食品科学与工程学院 山东省高校食品加工技术与质量控制重点实验室 山东 泰安 271018 2 齐鲁工业大学(山东省科学院)生物研究所 济南 250103)

    多糖作为天然高分子物质，常被用于结合活性物质以改善食品的质地、可加工性和稳定性等，也被用作稳定剂、药物载体和某些疾病的辅助治疗剂[3]。将多糖与活性物质结合制备复合物，不仅能够实现目标组分的靶向递送，而且有助于活性成分发挥协同作用。常见的菊糖、葡聚糖、果胶、变性淀粉等多糖可与黄酮、单宁等多酚类构建复合物，发挥协同降血糖、抗菌和改善肠道环境的作用[4-5]。然而，目前多糖与多酚协同发挥抗氧化作用的研究报道较少。研究多糖与多酚的协同抗氧化作用，有针对性地探究科学配比，是获取新型抗氧化剂的重要方法。

    牛蒡中含有丰富的多糖和多酚。牛蒡多糖中含量较高的是菊糖，约占牛蒡干重的34%[6-7]。菊糖为线性直链结构，主要由12 个呋喃型的果糖以β-2，1-糖苷键相连[8]。研究表明牛蒡多糖具有抗氧化，降血糖，免疫调节等多种生理功能，且易于制备，安全性和稳定性良好，在食品及医药领域有广泛的应用前景[9-11]。牛蒡中多酚类物质主要为咖啡酰奎宁酸类，包括咖啡酸、绿原酸和异绿原酸等[12]，其中绿原酸含量较高[13]，该成分具有良好的抗氧化，抗菌、消炎、抗病毒、降血糖、降血压等多种生物活性，在食品和医药方面应用广泛[14]。

    基于牛蒡多糖与绿原酸均具有良好的体内抗氧化作用，本研究推测两者复合后可能有体内协同抗氧化的作用，并进行验证。研究通过构建斑马鱼氧化损伤模型，筛选体内协同抗氧化作用最强的牛蒡多糖-绿原酸复合物比例，并对该复合物进行结构表征与体内、外抗氧化活性评价。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    材料：牛蒡，江苏沛县轶伟食品有限公司；绿原酸，成都曼斯特生物科技有限公司；转基因皮肤荧光斑马鱼CY17(krt4-NTR：GFP)，山东省科学院生物研究所。

    试剂：氯仿、正丁醇、无水乙醇，天津凯通化学试剂有限公司；甲硝唑，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；1，1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH)，梯希爱 (上海) 化成工业发展有限公司；2，2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸二胺盐(ABTS)、水杨酸，源叶生物科技有限公司；过硫酸钾、硫酸亚铁，国药集团化学试剂有限公司；Tris-HCl 缓冲液，鼎国昌盛生物技术有限责任公司；邻苯三酚，索莱宝科技有限公司；BCA 蛋白浓度测定试剂盒 ......