史玉东，刘梦瑶，宋 晨，李勇枝，卢卫红*

    (1 哈尔滨工业大学化工与化学学院 哈尔滨 150001 2 哈尔滨工业大学极端环境营养与防护研究所 哈尔滨 150001 3 内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司研发中心 呼和浩特 011500 4 中国航天员科研训练中心 北京 100094)

    营养是影响婴幼儿成长发育的重要环境因素之一，生命早期1 000 d 营养状态影响一生的健康[1]。世界卫生组织(WHO)推荐0～6月婴儿纯母乳喂养，母乳喂养的婴幼儿发育水平也成为WHO建议的孩子发育标准[2-4]。断乳期是从完全母乳喂养到充分利用家庭食物的过渡时期，也是婴幼儿成长发育的关键时期[5]。对于继续母乳喂养的7～12月龄婴儿，其所需要的部分能量，以及99%的铁、75%的锌、80%的维生素B6、50%的维生素C等必须从添加的辅食中获得[6-7]。肠道菌群与人的生长发育、健康情况息息相关，断乳期是肠道菌群构建的关键时期。最初，婴儿肠道菌群多样性差，辅食的添加会引起肠道菌群发生巨大改变并逐渐趋于稳定，接近成人[8]。研究营养干预对了解断乳期婴幼儿生长发育影响十分重要。

    鉴于婴幼儿的脆弱敏感性以及调查的(伦理学)难度，几乎没有对健康婴幼儿的营养干预性研究。对于婴幼儿营养摄入的了解主要依赖于一些观察性研究，如不同喂养方式下的婴幼儿生长发育研究。无菌动物(Germ free animal，GF 动物)作为微生物背景最清晰的动物，可有效进行菌群、基因及其它环境因素的控制，是研究肠道菌群对人类疾病及健康影响的最有效的动物模型[9]。利用无菌动物构建携带断乳期婴儿肠道菌群的人源菌群动物(Human floral-associated animal，HFA 动物)，可为饮食干预对肠道菌群的影响提供一个有效的模型。本文搭建了断乳期人源菌群小鼠模型，并验证人源菌群对小鼠大脑、肠道发育及免疫等相关指标的影响，为后续针对断乳期婴幼儿营养干预性研究提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 试验材料与试剂

    1.1.1 实验动物 昆明GF 小鼠，10～15 g，18 只，华中农业大学实验动物中心，许可证号：SYXK(鄂)2015-0084。

    1.1.2 菌群来源 粪便样本来源于顺产母乳喂养且未接受过抗生素治疗及服用益生菌类产品的6月龄健康女婴，粪样以每管200 mg 装入无菌EP管中，装若干管，液氮速冻，-80 ℃保存。

    1.1.3 试剂 E.Z.N.A.?Soil DNA Kit 抽提试剂盒 ......