贾志鹏，张新国*，郭广君，魏亚茹，谢栋栋，范晓英，张 继，黄丽娜，王邓拓，朱建宁

    (1 兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050 2 西北师范大学生命科学院 兰州 730060 3 甘肃省食品药品监督管理局审评认证中心 兰州 730070)

    植物内生菌，是指定殖于健康植物组织，在植物不同生长阶段与植物和谐共生的一类微生物[1]。研究显示，植物内生菌不仅对植物生长发育起到积极的调节作用，有些植物内生菌还能产生与宿主相同或相似活性的物质[2-3]。近年来，研究人员从不同植物内生菌次级代谢产物中发现了很多具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤等生物活性的物质，植物内生菌作为一个亟待开发的重要资源，正在被越来越多的研究人员所关注[4]。

    甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)为豆科甘草属多年生草本植物，具有“补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药之功效”。作为最常用的大宗药材，甘草素有“十方九草”和“药之国老”的美誉[5]。现代药理学研究表明，甘草的有效成分以黄酮类和三萜皂苷成分为主[6-8]，还包括香豆素类、生物碱类、多糖等化合物[9-11]，具有抗溃疡、抗肿瘤、抗病毒、免疫调节、抗氧化和治疗心血管疾病等功效[10]。

    从植物中分离筛选出具有生理活性的内生菌并获得其次生代谢产物，是药用植物资源替代的重要尝试，对于在一定程度上解决我国甘草野生资源的匮乏具有着重要的意义。研究显示[12-13]，不同培养基对内生真菌的分离的种类会产生一定的影响，不同培养基分离所得内生真菌的多样性也明显不同。甘草主要分布于我国东北、西北及华北等地区，其中又以宁夏、甘肃、内蒙和新疆等地所产的道地药材品质最佳，是我国在种植和应用上最为广泛的植物资源[14]。本研究采用9 种分离培养基对甘肃本地野生甘草不同组织中内生真菌进行分离，并采用不同的方法评价其代谢产物的抗氧化和抑菌活性，以期增加甘草内生菌的丰度并筛选出活性良好的菌株，为甘草深层次应用提供技术资料。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    甘草为采集自甘肃省庆城县野生全株，经兰州理工大学生命科学与工程学院杨林副教授鉴定确系为该种药材。

    标准供试菌使用两种革兰氏阴性菌绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、大肠杆菌(Escherichia coli) 和3 种革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) ......