杨秋萍，阎彦霏，张 艳，曹晨阳，盛焕精，崔生辉，杨保伟*

    (1 西北农林科技大学食品科学与工程学院 陕西杨凌 712100 2 富平县检验检测中心(陕西省羊乳产品质量监督检验中心) 陕西富平 711700 3 中国食品药品检定研究院 北京 100050)

    克罗诺杆菌(Cronobacter，原称阪崎肠杆菌)是一种食源性条件致病菌，可导致各年龄段人群感染，尤其是新生儿、早产儿、老年人和免疫力低下的人群。感染后可引起败血症、神经炎、脑脊髓炎、脑脓肿、脑积水和坏死性小肠结肠炎[1-2]。目前，已报道在婴幼儿配方乳粉和谷类辅助食品、奶酪、蔬菜、谷物等食品中检出克罗诺杆菌[3-4]。食品污染克罗诺杆菌后会对人体健康构成危害，然而，不是所有克罗诺杆菌都可导致人患病。研究发现，阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter Sakazakii)、丙二酸盐阳性克罗诺杆菌(Cronobacter malonaticus)和苏黎世克罗诺杆菌(Cronobacter turicensis)是引起新生儿和婴儿脑膜炎、败血症和坏死性小肠结肠炎的常见类型[5-7]。摄入被阪崎克罗诺杆菌污染的婴幼儿配方乳粉是导致新生儿和婴儿感染的主要原因[8]，感染引起的死亡率为40%～80%[9-10]。对婴儿配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌进行检测和追溯，对保障新生儿和婴儿食品安全至关重要。

    对致病菌分型是追溯其来源的关键。应用于阪崎克罗诺杆菌的分型方法主要有表型和分子分型，其中分子分型技术被认为是追溯微生物来源的最有力工具。目前已有脉冲场凝胶电泳(Pulse field gel electrophoresis，PFGE)、随机扩增多态性DNA (Random amplified polymorphic DNA，RAPD)、多位点序列分型 (Multilocus sequence typing，MLST)、多位点可变数目串联重复序列分析(Multiple locus variable-number tandem repeat analysis，MLVA)、肠杆菌间保守重复序列PCR(Enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR，ERIC-PCR)和全基因测序(Whole genome sequencing，WGS)等分型方法被用于阪崎克罗诺杆菌分型[6，11]，然而，不同方法有着各自的特点和局限。PFGE 分辨率高，是细菌分型的“金标准”，也是流行病爆发调查和食源性病原菌监测中最为常用的方法[12]。然而，PFGE 不能对基因组上缺乏XbaⅠ等限制性内切酶酶切位点的菌株进行分型 ......