甲鱼蛋蛋白水解物的体外消化及对抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响
胃肠道,1材料与方法,2试验仪器与设备,3试验方法,2结果与分析,1甲鱼蛋冻干粉及<2.5ku降糖肽组分的色泽,2消化前,后多肽含量的变化,3消化前,后的酶解原液及不同分子质量组分的液相色谱图
赵才冬,漆姚姚,雷楚文,裘乐芸,邓泽元,郑溜丰(南昌大学 食品科学与技术国家重点实验室 南昌 330047)
慢性病严重危害人类健康,其中糖尿病已成为全球疾病死亡的主要原因。据最新统计数据显示,全世界糖尿病的患者数超过4.63 亿,其中我国的糖尿病患者超过1.164 亿,成为糖尿病第一大国[1]。糖尿病可能引起各种并发症,主要是对眼、肾、心脏、血管及神经的慢性损害[2]。防治糖尿病刻不容缓。传统的降血糖药物多为人工合成的化合物,如α-葡萄糖苷酶抑制剂(阿卡波糖、米格列醇、伏格列波糖),被认为是治疗糖尿病的一线药物[3]。然而,现有的治疗药物有许多局限性,会产生包括胃肠和肝脏疾病等各种副作用[4]。近年来,膳食来源的天然化学物在防治糖尿病中具有重要作用[5]。迫切需要从膳食来源的天然产物库中探寻高效、低毒,具有降血糖功效的活性分子。
膳食中添加蛋白水解物能够以不依赖于胰岛素的方式,显著降低餐后血糖水平及改善胰岛素敏感性,提示蛋白酶解物中的活性肽具有很好的降血糖作用[6]。除了通过抑制α-葡萄糖苷酶来干扰碳水化合物消化外,减少小肠对葡萄糖的吸收也是治疗糖尿病的有效途径。氧化应激被认为是糖尿病发生、发展的重要诱因之一[7]。现有研究表明,活性氧可通过影响葡萄糖转运载体的表达,促进小肠摄取葡萄糖,而植物化学物,如白杨素和绿原酸可通过清除活性氧来减少葡萄糖摄取[8-9]。使用抗氧化天然化合物等,被认为是糖尿病治疗的新方法。
本课题组前期通过木瓜蛋白酶水解甲鱼蛋蛋白制备分子质量<2.5 ku 组分,其具有较强的抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性,是潜在的降血糖组分[10]。此外,了解活性肽在胃肠道消化后的活性功效,对于评估其生物活性及生物利用度至关重要[11]。甲鱼蛋<2.5 ku 组分的胃肠消化特性及其消化后是否仍具有活性功效等问题亟待研究。本研究通过体外模拟胃及胃肠道消化模型,探究甲鱼蛋<2.5 ku 组分的胃肠消化特性、消化前后抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性的变化,为糖尿病的防治提供新方法。
1 材料与方法
1.1 材料
甲鱼蛋冻干粉,木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、谷胱甘肽,Sigma 公司。
1.2 试验仪器与设备
Cr-103 型nh 色差仪,厦门海达仪器有限公司;XW-80A 型涡旋仪,上海沪西分析仪器厂;SHZ-A 型水浴恒温振荡器,上海博迅实业有限公司;Agilent 1100 系列高效液相色谱仪,安捷伦科技有限公司 (液相色谱柱为Waters XBridg BEH SEC 柱);FD-1 型冷冻干燥机 ......
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