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编号:38753
特定益生元对内源性乳酸菌的富集作用
http://www.100md.com 2022年12月31日 2022年第11期
氮源,果糖,1材料与方法,1实验动物与试剂,2仪器与设备,3试验方法,2结果与分析,1不同营养物质对粪便微生物生长的影响,2不同方式富集粪便微生物后体外培养及鉴定研究,3不同方式富集后粪便微生物的多样性研究,3结论
     陈 妍,费 苏,夏永军,艾连中,王光强

    (上海理工大学健康科学与工程学院 上海食品微生物工程技术研究中心 上海 200093)

    益生元是膳食补充剂之一,通常不能直接被机体消化吸收,然而,可以被肠道有益菌发酵利用刺激其生长繁殖或是激活代谢功能活性,从而改善宿主健康[1-3]。益生元主要包括功能性低聚糖类、多糖类、天然植物提取物以及多元醇等,目前最常见的低聚糖类益生元主要包括低聚果糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖和低聚木糖[4-5]。大多数益生元为碳水化合物且结构多样、组成复杂,在人和动物的饮食中普遍存在[6]。益生元从动、植物中提取得到,由于存在多个单糖成分,因此更容易被益生菌吸收利用[7]。有大量研究发现益生元可以改善体内菌群丰度,增强益生菌的肠道定植能力,减少有害微生物的代谢,增强机体免疫,调节便秘和腹泻等[8-11]。合格的益生元应具备在人体内不被上消化道水解吸收,并且在胃酸的环境下保持稳定,最终到达结肠,达到促进肠道有益菌群的生长与繁殖,改善宿主健康的效果。王艺苑等[12]将不同剂量的低聚半乳糖添至初断乳SD 大鼠饲料中,发现低聚半乳糖可有效促进大鼠体内乳酸杆菌和双歧杆菌的繁殖,在大鼠粪便中的相对丰度也明显增加。由于菌株之间具有差异性,各菌株的糖代谢途径也有所不同,从而导致不同益生菌对益生元的吸收利用也有所不同[13],亟需探究益生元对菌株的富集作用。

    粪便是通过胃肠道代谢出来的生理产物,可以间接反映肠道环境以及肠道微生物的情况[14]。本研究以小鼠粪便为对象,探究小鼠粪便微生物生长所需限制性营养因子,并通过分析粪便微生物组成结构和多样性的变化,得出不同益生元对粪便微生物生长的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与试剂

    健康SPF 级雄性C57 BL/6J 小鼠,体质量(20± 2)g,购自上海杰思捷实验动物有限公司,许可证号码:SCXK(沪)2018-0006。饲养温度控制在(22 ± 2)℃,相对湿度控制在(50 ± 10)%,12 h 光照和12 h 黑暗交替循环,在整个饲养期间小鼠自由饮食饮水。所有涉及动物的程序均严格按照中国有关实验动物的相关饲养规范和法律规定。

    低聚果糖,国药集团化学试剂有限公司;胰蛋白胨,上海润捷化学试剂有限公司;rTaq Mix,上海生物工程股份有限公司;DNA 提取试剂盒(E.Z.N.A.Stool DNA Kit),美国Omega Bio-Tek 公司;琼脂糖(RA1011-Agarose LE-100G),上海捷瑞生物工程有限公司;DL2000 DNA Marker ......

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