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编号:38757
藜麦活性蛋白的制备及抗结肠癌效应评价
http://www.100md.com 2022年12月31日 2022年第11期
划痕,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,4数据处理与分析,2结果与分析,1藜麦蛋白的活性检测,2WQP抑制人结肠癌细胞DLD1,HCT-8的增殖,3WQP抑制人结肠癌细胞DLD1,HCT-8细胞克隆形成能力
     加 英,张雪琛,史江颖,单树花,李卓玉,*

    (1 山西大学生命科学学院 太原030006 2 山西大学生物技术研究所 化学生物学与分子工程教育部重点实验室 太原 030006)

    结肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一种消化道恶性肿瘤,是世界范围内最常见的癌症,严重危害人类健康和安全[1-2]。据2018 年全球癌症数据统计,结肠癌的发病率和死亡率分别居于第3 位和第2 位[3],其发病率预计在未来的几十年内持续增加[4]。目前临床上对于结肠癌采用以手术为主、药物化疗为辅的综合治疗方式,这种治疗方式具有一定的局限性,可能会引起肿瘤细胞转移,还会产生极大的耐药性及毒副作用,损坏正常脏器,给患者带来二次伤害。寻找绿色、高效和低毒的预防结肠癌的功能食品是目前研究者的关注点。

    藜麦(Chenopodium quinoa willd.)又称金谷子,是一种一年生草本开花植物,属藜科藜属[5]。近年来,藜麦在山西省大规模种植,主要分布在忻州市、朔州市等地区。在营养学领域,藜麦有“全营养食品”的美称,富含人体所需的全部营养物质,与日常食用的大多数粮食谷物,如小麦、玉米、稻米、高粱等相比营养和食用价值更高,被誉为“超级谷物”,是世界范围内极具发展潜力和保健功效的农作物之一[6]。数千年来,人们一直在日常饮食中摄入藜麦,旨在预防多种疾病并降低各种疾病的发病风险[7]。藜麦能产生具有多种生物活性的次生代谢产物,在过去40 年里,从藜麦中鉴定出至少193 种次级代谢产物,主要包括皂苷、酚酸类、黄酮类、萜类、甾醇类和含氮化合物[8]。这些代谢产物中富含多种生物活性物质,可有效预防和改善炎症、心血管疾病、高血糖、高血压、骨质疏松症等多种慢性疾病[9],对人们的健康有极大的益处。藜麦中的一些功能分子还有抗菌[10]、抗癌[11]、抗氧化[12]、细胞毒性[13]、抗糖尿病[14]和抗炎[15]等营养功效。此外,藜麦中蛋白质含量高,氨基酸比例合理,特别是含有普通谷物中最容易稀缺的赖氨酸(4.6%~6.6%)及蛋氨酸(0.4%~1.0%),具有较高的保健功效。目前提取藜麦蛋白多采用碱提酸沉的方法[16],即先在碱性溶液中浸提,后在酸性条件下沉淀蛋白,并通过生物化学手段获得藜麦活性肽,如:蛋白酶解法[17]、微生物发酵法[18]及模拟消化法[19]等,若酸、碱操作不慎会引起蛋白的变性,进而影响蛋白的生物活性,然而,目前通过无机盐沉淀来获取高生物活性的藜麦蛋白鲜见报道。

    基于此,本研究以山西特色藜麦资源为原料,利用丙酮-硫酸铵沉淀法提取藜麦蛋白 ......

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