罗雨佳，黄子彧，林莹莹，郭慧媛，2*

    (1 中国农业大学食品科学与营养工程学院 北京100083 2 中国农业大学营养与健康系 北京100193 3 国家乳业技术创新中心 北京 100193)

    母乳是新生儿最好的营养来源[1]，对婴儿的胃肠道健康、神经以及免疫系统的发育至关重要。母乳的功能与成分之间有密不可分的联系。它不仅提供基础的营养物质(如碳水化合物、脂肪、蛋白质等)，还包含一些非营养性的生物活性因子，比如外泌体、乳铁蛋白等，这些活性物质在人体的生长发育中同样有着重要的作用。

    外泌体是一类直径约30～200 nm，具有脂质双层结构的微小囊泡[2]。外泌体能够携带一些信号分子，在细胞间的生物信息交流过程中发挥重要作用[3]。它存在于大部分体液中，如血液、尿液以及唾液等[4]。乳汁是一种丰富的外泌体来源。目前对于乳源外泌体的研究主要集中在疾病诊断物和药物载体靶向治疗方面[5]。乳源外泌体的生理功能是近年来的研究热点，乳源外泌体在免疫调节[6]、炎症预防[7-8]以及肠道发育[9]的功能已被证实。然而，这些研究大都针对内源性外泌体，对于外源性外泌体(例如乳源外泌体)的生理功能研究还处于初级探索阶段。

    外泌体主要的组成部分是蛋白质(膜连蛋白、肌动蛋白等)、核酸(micoRNA、lncRNA 等)和脂质。有研究表明，乳源外泌体有泌乳期特异性的特点，而乳源外泌体中的miRNA 被认为是乳源外泌体发挥生理功能的主要贡献者[10-11]。每一种miRNA 都有其特定的生物学功能，而发挥功能需要达到特定的表达量[12-13]。据报道，泌乳期会影响乳源外泌体中miRNA 的种类与表达量[14]。了解不同泌乳期乳源外泌体中miRNAs 的表达情况，对探究不同泌乳期乳源外泌体的功能有重要意义。部分研究表明泌乳期影响乳源外泌体中miRNAs 的种类及表达量[15-16]。然而，这些研究大都集中在其它哺乳动物上(如牛乳、猪乳)，目前关于泌乳期对人乳外泌体中miRNAs 种类及表达量的影响还鲜有报道。此外，乳源外泌体中还有大量与炎症相关的miRNA[17-18]，这些miRNA 对婴幼儿预防及抵抗炎症疾病有着重要的意义，然而，目前未见有关泌乳期对乳源外泌体中炎症相关miRNA 有影响的报道。

    本研究采用超高速离心法获得囊泡结构物质，从形状、粒径和标记蛋白3 个方面对外泌体进行鉴定。利用高通量测序分析比较不同泌乳期人乳外泌体中miRNA 的种类与表达量，在此基础上筛选出表达量高和表达量变化有显著差异的miRNA，以探究不同泌乳期间人乳外泌体中miRNA 的种类及表达水平的变化 ......