马宇昊，赵力超，方 祥，梁文欧，吴雪娇，王 丽

    (华南农业大学食品学院 广州 510630)

    大豆异黄酮(Soy isoflavones)是包括黄豆苷元、染料木素等一类具有雌激素活性的多酚类物质，存在于大豆及其加工制品中[1]。流行病学研究表明，摄入高水平的大豆异黄酮可以减少与激素依赖和衰老相关疾病的发病率，如骨质疏松症、心血管疾病和癌症[2-3]，而大豆异黄酮的功能取决于其生物利用度及肠道活性代谢物[4]。大量研究证实，黄豆苷元(Daidzein)在人体内最终代谢产物之一雌马酚(Equol)比其本身更具生物活性[5-6]。大豆异黄酮的生物学作用在一定程度上可归因于雌马酚[7]。然而，只有20%～50%的人能在体内产生雌马酚[8]，影响雌马酚微生物转化的因素至今不明。如何提高雌马酚的产量并使更多的人和动物具有产雌马酚的能力，成为大豆异黄酮相关益生作用研究的热点[9]。利用粪便菌群体外厌氧发酵是目前研究雌马酚转化机制和雌马酚产生菌的有效手段[10-11]。研究发现，在体外模拟肠道环境条件下培养的雌马酚产生者的粪便菌群能够代谢黄豆苷元产生雌马酚[12]。精确定量代谢过程中前体物质黄豆苷元和代谢转化为雌马酚，是判断粪菌群代谢能力的重要参数。在用粪菌群模型模拟人体肠道菌群生物转化大豆异黄酮过程中，需要一种用于精准定性和定量检测发酵液中黄豆苷元和雌马酚的方法，这是研究肠道菌群生物转化黄豆苷元为雌马酚，提高大豆异黄酮生物学作用的试验基础。

    目前已报道检测雌马酚的主要方法包括紫外法[13-14]、液相色谱法[15-17]、气相色谱法(GC)[18]、气相色谱-质谱法(GC-MS)[19]和超高效液相色谱法(UHPLC)[20]等。紫外法虽可定量计算样品中异黄酮的含量，但无法判断样品中各组分的构成情况。此外，该方法检测前需对样品进行纯化处理，操作要求较高，消耗时间长[21]。气相色谱法需制备黄豆苷元和雌马酚的衍生物，步骤较为复杂。液相色谱法、液相色谱-质谱法和超高效液相色谱法具有应用范围广、分离效率和灵敏度高、分析速度快、自动化程度高、样品制备步骤少等优点[22-24]。然而，相比于价格昂贵的GC-MS 和UHPLC，HPLC 更广泛地应用于大豆异黄酮及其代谢产物的定量检测。目前建立的高效液相色谱法检测雌马酚的方法主要适用于尿液样本。李岩等[25]虽建立了HPLC 检测人体尿样中雌马酚的方法，但没有同时检测到黄豆苷元的消耗情况，不能用lg(S-雌马酚/黄豆苷元)的指标来判断受试者是否为雌马酚产生者[4]。王安易等[26]利用TLC 和HPLC 结合的方法定性检测尿液中的雌马酚 ......