郭前婉，彭舒悦，王晨晨，赵萌*，Michael G.Gaenzle，2

    (1 发酵工程教育部重点实验室 湖北省工业微生物重点实验室 湖北工业大学 武汉430068 2 阿尔伯塔大学农业、食品与营养科学系 加拿大埃德蒙顿 T6G 2P5)

    10-HOE 是一种典型的微生物源羟基不饱和脂肪酸，主要通过亚油酸水合酶催化亚油酸，对其顺9 位双键进行羟基化而合成[1-2]。据文献报道，10-HOE 具有良好的真菌抑制效果[3-5]，添加在发酵面包中其抑菌效果堪比商业防腐剂[6-7]；对大脑炎症有潜在的调节和控制作用[8-10]；通过小鼠实验发现10-HOE 还可有效预防过敏性皮炎[11]。10-HOE 在食品、生物医药等领域应用潜力巨大，其高效制备具有重要意义[1，12]。

    10-HOE 是微生物合成共轭亚油酸的中间产物，主要是由含有10-亚油酸水合酶的野生菌或重组菌等进行生物合成[13-14]，因而可通过静息细胞法进行生物合成。静息细胞法生物合成的影响因素主要有pH、温度、辅酶及其浓度、底物及菌体浓度等[15-17]。目前，有研究发现化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)[18]，短双歧杆菌(Bifidobacteium breve)[19]，鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)[20]，植物乳杆菌(L.plantarum)[20]，嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)[20]，动物双歧杆菌乳酸亚种(Bifidobacterium animalis subsp.Lactis)[20]，汉氏乳杆菌(L.hammesii)[21]，罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)[21]，穗状左乳杆菌(Levilactobacillus spicheri)[21]等菌具备合成10-HOE 的能力。而与一般的野生菌相比，基因工程菌含有高活性、高特异性的胞内酶，可大量表达目标酶，应用到静息细胞转化中，不仅可以有效发挥酶的作用，维持酶的稳定性，而且其细胞转化效率高，产物杂质少，处理更简单[22-23]，是产业化生产10-HOE 的有效途径。

    目前，10-HOE 生物合成研究较少[24]，尚未有重组静息细胞大量合成10-HOE 的研究报道。10-HOE 是近年来研究的一种新型功能性脂肪酸，为探索其各种生物活性，有必要大量生产10-HOE，而静息细胞法是10-HOE 生物合成的有效途径。本文利用含有10-亚油酸水合酶的重组大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)/ pET28a-ZS2058-mcra 对底物亚油酸进行静息细胞转化合成10-HOE ......