秦明倩，马嘉琦，黄巾凌，冯承谦，卢行安，赵红阳，周巍，崔生辉，杨保伟*

    (1 西北农林科技大学食品科学与工程学院 陕西杨凌 7121002 汉中市汉台区市场监督管理局 过街楼蔬菜批发市场监管所 陕西汉中723000 3 中国检验检疫科学研究院 北京100176 4 河北省食品检验研究院 河北石家庄050000 5 中国食品药品检定研究院 北京 100050)

    在众多食品安全风险中，微生物污染已成为全球性公共安全威胁[1]。据WHO 统计和发布，致病性微生物导致全世界70%食源性疾病的发生[2]，它们会在生产、加工和运输等各个阶段污染食品，造成食源性疾病爆发[3]。比较近些年来我国家庭中食源性致病菌引发的疾病暴发事件，了解到沙门氏菌占据食源性致病菌的首位[4-5]，使人们更加关注食品微生物风险防控[6]。抗生素药物使用是防控致病菌感染最直接、有效的手段[7-8]。β-内酰胺类药物抗菌谱广，杀菌能力强，低毒，治疗效果好[9]，然而，大量使用导致很多食源性致病菌对其产生耐药性。研究者揭示其耐药是由于致病菌产生的β-内酰胺酶会与抗生素快速牢固结合，干扰抗生素进入靶位发生作用，或者水解抗生素[10-11]，使其抗菌活性丧失[12]，以及β-内酰胺酶相关编码基因通常会频繁地在不同细菌间转移[13]，导致此类抗生素耐药性传播范围扩大。据统计，目前已有肠炎沙门氏菌、动物源致病性大肠杆菌、泛耐药铜绿假单胞菌等对β-内酰胺类抗生素的耐药率在逐年增加[14-17]。

    标准物质兼具均匀性强、稳定性好，测量值精准等特点[18-19]，可避免含复杂成分检测背景的干扰。近年来，我国食源性细菌耐受β-内酰胺类抗生素非常普遍，迫切需求准确、快捷检测食源性致病菌携带耐药基因的方法，开展相关菌株的标准物质研制，利于更有效溯源和控制污染源的传播[20]。同时，微生物检测参考菌株的研究、验证和使用可以实现具有自主知识产权菌种在食品微生物标准样品领域的广泛应用，缩短抽检、监测机构标准样品采购周期，降低采购价格[21]。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    1.1.1 菌株 3 株供试菌均为沙门氏菌(Salmonella)，来源于农贸市场、超市零售食品和食源性疾病临床样本，保存于-80 ℃超低温冰箱。供试菌已获得中国医学细菌保藏中心(National Center for Medical Culture Collections，CMCC)保藏号。标准菌株鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium LT2)由中国食品药品检定研究院惠赠 ......