玉米糖肽对酒精诱导损伤LO2细胞的保护效应
酒精性,存活率,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3试验方法,2结果与分析,1玉米糖肽对LO2细胞的毒性效应,2玉米糖肽对酒精诱导损伤的LO2细胞存活率的影响,3玉米糖肽对酒精诱导损伤的LO2细胞的保护效果
王晓杰,童 玲,刘晓兰(齐齐哈尔大学食品与生物工程学院 黑龙江省玉米深加工理论与技术重点实验室 黑龙江齐齐哈尔 161006)
据世界卫生组织(WHO)报告,饮酒与200 多种疾病和伤害有关[1]。 肝脏是酒精代谢的主要器官,90%的酒精摄入量由肝脏代谢,肝脏也是酒精毒性的主要靶器官[2]。长期大量饮酒或酗酒容易引发肝脏损伤性疾病,且不容易受到控制。酒精性肝损伤的特征是脂肪变性、炎症、坏死,最终导致纤维化和肝硬化,约有15%的酒精性肝硬化患者会发展成肝癌,其引发的健康和社会问题不容忽视[3-4]。目前,酒精性肝病的临床治疗主要采取戒酒、营养支持和对症治疗等综合疗法,目的是减轻酒精性肝损伤的临床症状,降解清除已经形成或者正在形成的纤维组织,以防止肝硬化的发生。尽管现代医学取得了长足的进步,但仍没有特效药物能使肝病患者痊愈,而且一般的抗酒精药物会导致副作用或产生新的毒性[5-8]。 研发拮抗酒精性肝损伤的天然、低毒副作用、多途径的肝保护剂,是目前医学和食品科学领域共同关注的问题。
玉米糖肽是玉米蛋白经蛋白酶水解获得低分子质量的玉米肽,然后,在转谷氨酰胺酶催化下与氨基糖共价结合的产物。与玉米肽相比,玉米糖肽的溶解性显著增加,并具有更高的抗氧化活性及乙醇脱氢酶激活活性[9-10],推测玉米糖肽具有在体内发挥促进酒精代谢和拮抗酒精性肝损伤的潜力。然而,目前鲜有关注玉米糖肽在细胞水平上拮抗酒精性肝损伤的活性研究。
本试验以细胞存活率为指标,构建LO2 细胞酒精性损伤模型,然后,用构建成功的LO2 细胞损伤模型,以GSH 为阳性对照,从LO2 细胞存活率、酒精代谢酶活力、氧化应激水平及细胞凋亡情况等角度,评价玉米糖肽对酒精诱导损伤的LO2细胞的保护效应,并分析可能的保护机制,为后续用动物模型研究玉米糖肽拮抗酒精性肝损伤的效应及作用机制奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
LO2 细胞株,南京凯基生物技术有限公司;噻唑兰(MTT),上海生工生物技术有限公司;DMEM高糖培养基、 胎牛血清、0.25%胰蛋白酶,Gibco 公司;丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、 天冬氨酸氨基转移酶 (Aspartate aminotransferase,AST)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、活性氧簇(Reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase ......
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