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编号:223975
活性引导结合高速逆流色谱分离蓝莓活性成分及其与α-葡萄糖苷酶的相互作用
http://www.100md.com 2023年2月17日 中国食品学报 2023年第1期
组分,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1α-葡萄糖苷酶抑制效果,2HSCCC组分及其对α-葡萄糖苷酶抑制效果,3组分结构鉴定,4荧光光谱分析,5圆二色谱分析
     杨兆艳,田艳花,王玲丽,谭佳琪

    (1 山西药科职业学院食品工程系 太原 030031 2 运城学院生命科学系 山西运城 044000 3 北京大学前沿交叉研究院 北京 100091)

    天然产物的化学成分非常复杂,传统的分离方法存在操作复杂、 耗时长和效率低等问题。 因此,提出一种潜在的以活性为导向的分离方法,以提高活性化合物的分离效率[1]。通过活性引导结合色谱技术对活性化合物进行富集和分离,最终得到高纯度活性化合物,该技术已被成功应用于抗菌香豆素[2]、抗肿瘤药物[3]和水溶性抗氧化剂[4]分离。柱色谱是活性引导中最重要的色谱技术,常用于从天然植物资源中分离各种活性化合物,然而,该技术在分离化合物的过程中,不可逆吸附会造成微量活性化合物丢失[5]。 该现象可以通过液-液萃取来避免,液-液萃取通常被用于粗提物的初步纯化。 传统的液-液萃取分离效率低,导致萃取物的组成仍非常复杂,因此需改进以获得目标活性成分。高速逆流色谱(High-speed counter-current chromatography,HSCCC) 作为一种不需要任何固体相作为载体的连续液-液萃取方法,被广泛用于从粗提物中制备活性化合物[6-7]。 HSCCC 可以避免样品在固相上的不可逆吸附。与传统色谱法相比,HSCCC 可以提高样品的载样能力,便于活性物质的大规模制备。 采用HSCCC 分离后,目标组分中的杂质大幅减少,有效成分的分离成功率显著提高。

    蓝莓(Vaccinium spp.)属杜鹃花科越橘属,广泛种植于世界各地,尤其在我国东北地区种植面积较广。 蓝莓中富含花色苷、酚酸、超氧化物歧化酶和各种维生素等活性成分[8]。大量研究表明蓝莓中活性化合物具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎和抗衰老等功效[9]。 此外,蓝莓中的一些化合物可以改善血糖和血压水平[10]。 α-葡萄糖苷酶作为一种水解酶,具有水解和转糖苷的双重功能。 它被广泛应用于乙醇发酵、低聚糖生产、淀粉水解、食品成分分析和代谢机理研究等方面[11]。 α-葡萄糖苷酶通过加水切割寡糖/多糖中的α-1,4-糖苷键,产生游离的α-D-葡萄糖,易被肠细胞从血液中吸收,导致餐后血糖水平升高[12]。 而控制餐后血糖水平是治疗或预防2 型糖尿病的关键。 目前α-葡萄糖苷酶被用作治疗2 型糖尿病的靶点酶,临床药物一般通过抑制其活性来治疗2 型糖尿病[13]。 虽然这些药物在临床上有效,但是长期使用耐药性增强,同时会产生不良反应。 天然活性化合物被作为潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂,可以避免上述问题。 目前,有研究表明,酚酸和黄酮类化合物对α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制作用[14-15] ......

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