周康熙，陈思鹏，王泽楠，吴 俐，吕旭聪，倪 莉*

    (1 福州大学石油化工学院 福州 350108 2 福州大学食品科学技术研究所 福建省食品生物技术创新技术研究中心 福州 350108)

    红曲又称“丹曲”，以熟米为原料经红曲菌发酵而成，在中国已有上千年的食用和药用历史，现今常作为着色剂、发酵剂、功能性添加剂和食品防腐剂[1-2]。 红曲菌对有益代谢物的代谢能力决定了红曲的应用价值，因此优质红曲菌的选育尤为重要。福建省是红曲的重要产区，为中国市场提供了85%以上的红曲，然而，这些红曲多采用古法技艺制备，其质量参差不齐[2-4]。

    为提高红曲质量，需对红曲菌进行分离鉴定并筛选优质菌株。然而，当前红曲菌的分类鉴定和优质菌株筛选方法尚有不足。 红曲菌泛指红曲菌属(Monascus)，在分类学中属于真菌门(Eumycophyta)、子囊菌亚门(Ascomycotina)、不整囊菌纲(Plectomycetes)、散囊菌目(Eurotiales)、红曲菌科(Monascaceae)，是红曲菌科中唯一的隶属分类单元[5]。 红曲菌的鉴定主要在于种水平的鉴定。 红曲菌的鉴定方法较多，常用的是形态学鉴定和分子生物学鉴定，由于不同鉴定方法的原理和标准不同，因此对红曲菌的物种分类不尽相同，容易造成鉴定分类上的混淆，进而可能对某一类菌种的特性造成误判[6-8]。此外，红曲色素是红曲菌分泌的应用价值较高的次级代谢产物，具有着色、保健、防腐等功效[9]。 在筛选高产红曲色素的优质红曲菌时，还要考虑真菌毒素桔霉素的产量[10]。 色素与桔霉素的前端代谢通路相同，在合成四酮体之后分化为2 条代谢通路[11-13]，使得色素产量与桔霉素产量间并无直接关联。 如何合理地筛选高产红曲色素而低产桔霉素的优质红曲菌成为研究重点。

    本研究以福建省红曲主产区收集的红曲为样本，研究快速分离纯化红曲菌的方法，构建福建省区域红曲菌菌株库。 采用红曲菌形态学鉴定、ITS分子生物学鉴定和18S 分子生物学鉴定3 种方法鉴定红曲菌，将鉴定结果数字化并进行相关性分析，为红曲菌的分类、鉴定提供数据支持。 最后对所分离的菌株进行色素和桔霉素测定，结合产量换算方法筛选出优质红曲菌，为红曲菌种质资源的挖掘提供借鉴。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    红曲，福建省各产区的红曲厂；米粉，由福州市闽侯县上街镇粮油站购置的籼米，经过磨粉，过100 目筛而得；马铃薯琼脂培养基(PDA)、察氏琼脂培养基(CYA)、麦芽浸膏琼脂培养基(MEA)、麦芽汁琼脂培养基(Wa)等红曲菌培养基 ......