王 艳，赵 宁，李虹佳，王 悦，辛嘉英，张 娜

    (哈尔滨商业大学食品工程学院 哈尔滨 150076)

    如今，随着各种工艺生产量的提高，对农药的需求也日益增多[1-3]。 有机磷农药(OPPs)因具有高效的杀虫性和低廉的价格而被广泛使用，其是一种含矿物质元素——磷的有机化合物，将其适当地应用于农作物中，可保证农作物产量稳定[4-6]。然而，当有机磷在农作物及果蔬中残留过量时，人类食用后会导致急性中毒，还会导致癌症、突变的发生，因此，有机磷农药残留量的高效、快速检测成为近年来的研究热点[7-9]。 目前普遍采用气相色谱法[10]、高效液相色谱法[11]和快速酶抑制检测法[1]检测有机磷，然而，这些方法所用仪器昂贵，需要专业人员操作，并且易被干扰，灵敏度低，需要较复杂的有机溶剂进行前处理，不能用于现场检测[12-13]。为此，研究一种成本低，操作简单，节省时间的新型快检技术尤为重要。电化学方法具有反应迅速，使用便捷，检测准确等优点，并因灵敏度高、选择性好而备受关注[14-15]。 已成为组分分析的重要方法，并且广泛应用于环境、生物和医药领域[16]。

    天然酶在温和适宜的条件下，可以高效催化各类生物化学反应，具有高特异性、底物专一性和高选择性等特点[17-19]。 而活性易受环境影响，并且制备成本高，价格昂贵等缺陷使其应用范围受限，利用纳米材料开展酶的固定化研究是近些年的新兴技术[20-24]，特别将金纳米粒子(AuNPs)作为固定化酶的载体材料，不仅可以增加固定分子数量，而且其优良的生物相容性，更有利于维持酶分子高级结构的稳定性[25-27]。 同时，AuNPs 可使传感器表面积呈指数增加，从而显著增加其催化效率[28-29]。

    本文采用电沉积法构建固定化酶生物传感器，在差分脉冲伏安(DPV)模式下开展有机磷农药的特异性、超痕量反定量检测研究(图1)。 以氯化乙酰胆碱(ATCh)为底物分子，固定化氯化乙酰胆碱酯酶 (AChE-AuNPs) 与固定化胆碱氧化酶(COD-AuNPs)水解ATCh 为基础催化反应，基于层层组装技术将固定化酶共修饰于金电极上，构建固定化酶生物传感器(AChE/COD@AuNPs-Gold Electrode)，通过循环伏安法分析双酶生物传感器的构建过程，利用DPV 法确定电化学检测体系的最佳条件，考察峰电流信号下降高度与有机磷农药浓度的线性关系。 通过有机磷农药(OPP)特异性抑制氯化乙酰胆碱酯酶进行水解反应，使产物无法被氧化，电信号下降，进而实现有机磷的快速、超痕量反定量检测。该方法可以弥补目前电化学方法检测有机磷遇到的一些问题 ......