彭 东，赖玉健，田柬昕，钟碧銮，安苗青，黎 攀，3，杜 冰，3*

    (1 华南农业大学食品学院 广州 510642 2 广东参之源健康科技有限公司 广州 510000 3 华南农业大学与官栈鱼胶营养安全研究中心 广州 510642)

    鱼鳔位于硬骨鱼体腔内的背部，是鱼维持平衡的重要器官。在鱼类加工过程中，鱼鳔经常被作为废弃物处理，造成资源的浪费，鱼鳔的高值化利用引起人们的关注[1]。鱼鳔在我国有着悠久的食用和药用历史，最早的食用文字记录可追溯到北魏时期的《齐民要术》，药用文字记录可追溯到唐朝的《本草拾遗》。鱼鳔的主要成分为胶原蛋白，鱼鳔多肽是胶原蛋白的酶解产物，具有抗氧化、抗衰老、抗疲劳和抗癌等多种功效[2-4]。

    前列腺癌是全球男性最常见的恶性肿瘤之一[5]。在我国，前列腺癌的发病率和死亡率呈逐年增高的趋势，前列腺癌的防治是我国公共卫生当前面临的重大挑战[6]。抗癌肽具有易获得性、生物相容性、高效性和低毒性等多种优点，在癌症治疗中表现出巨大的潜力[7]。研究表明抗癌肽的作用机制主要包括：参与诱导癌细胞周期停滞、诱导癌细胞凋亡、抗癌细胞血管新生、抑制肿瘤干细胞和激活机体免疫应答[8-10]。课题组前期测得黄鱼鱼鳔中蛋白质含量高达75%以上，是生产胶原蛋白肽的优质原料来源[11]。本试验从黄鱼鱼鳔酶解产物中分离纯化抗前列腺癌肽，探究其对前列腺癌细胞DU-145 细胞的作用效果，并推测诱导细胞凋亡的机制，以期明确黄鱼鱼鳔肽抗前列腺癌的作用机制，同时也为黄鱼鱼鳔的高值化利用提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    干制黄鱼鱼鳔，购买于当地海鲜市场；前列腺癌细胞DU-145 细胞、DU-145 细胞专用培养基，武汉普诺赛生命科技有限公司；胰蛋白酶消化液、二甲基亚砜，美国Amresco 公司；二硫苏糖醇(DTT)、碘乙酰胺(IAA)，美国Sigma 公司；AO/EB染色试剂盒、Annexin V-FITC 试剂盒、PI 试剂盒、BCA 蛋白质定量检测试剂盒，生工生物工程(上海)股份有限公司；CCK-8 试剂，广州松鼠生物科技有限公司；Bax、Caspase-3、Caspase-9 和β-actin抗体，美国Cell Signaling Technology 公司；中性蛋白酶、碱性蛋白酶，广州柏棠贸易有限公司；Sephadex G-25 凝胶填料、DEAE-52 凝胶填料，北京瑞达恒辉科技发展有限公司；其余试剂为分析纯级。

    1.2 仪器与设备

    LC-20AT 高效凝胶渗透色谱仪、1260 高效液相色谱仪、1290-6470 超高压液质联用色谱仪 ......