高春燕，杨文艺，洪 玥，张天阳，李 望，李媛丽，卢跃红*

    (1 北方民族大学生物科学与工程学院 银川 750021 2 大理大学公共卫生学院 云南大理 671000)

    肝脏疾病是最常见的慢性疾病，包括肝炎、肝硬化、纤维化和肝细胞癌，已成为死亡和疾病的首要原因之一[1]。许多因素，如营养不足、病毒感染、酒精和药物依赖、异生物暴露和代谢性疾病，都参与了肝脏疾病的产生和进一步发展[2]。根据全球疾病负担(GBD)相关数据，近年来因肝脏疾病而死亡的人数有二百多万，约占全球总死亡人数的百分之四[3]。肝脏疾病正成为一个相当大的公共卫生负担。CCl4是一种常用于肝损伤模型的化学制剂，经代谢产生活性氧自由基，进一步与细胞分子结合，诱导氧化应激反应的发生，从而导致细胞损伤、炎症和凋亡[4]。据报道，植物酚类化合物可以改善氧化应激和炎症引起的肝损伤，并预防肝脏疾病的发生[5-8]。

    地参(Lycopus lucidusTurcz.)，系唇形科(Labiatae)地笋属多年生草本植物，属云南高原特色食品资源，以大理剑川沙溪镇分布最为广泛，且品质最优。民间传统以炒食、做汤、油炸、腌渍食用为主。地参富含矿物质、有机酸、维生素、粗脂肪、氨基酸和酚类化合物等营养成分[9-12]，具有降血糖[13-14]，降血脂[13]，抑制体外肿瘤细胞生长[15]，抗D-半乳糖所致小鼠衰老[16]，提高免疫功能[17]，抑制消化酶[18-19]，抗氧化[11-12，20-21]，保肝[7，22]等多方面生理功能。

    植物多酚以游离和结合两种形式存在于植物体内，与游离酚相比，结合酚是与其它物质结合而存在的酚类化合物。前期研究显示[11-12，20-21]，地参结合酚含量丰富，主要含有的单体酚类化合物为咖啡酸，且具有显著的抗氧化活性，而肝损伤通常伴随着氧化损伤。本研究采用体外CCl4损伤肝细胞模型，通过细胞存活率和肝功能指标(ALT、AST 和LDH)评价地参结合酚的体外保肝作用。同时，检测脂质过氧化产物、抗氧化指标(SOD 和GSH)、炎症反应因子(TNF-α、IL-6 和IL-8)、Caspase-3 活化程度、细胞凋亡及线粒体膜电位的变化，从抗氧化，抑制炎症反应和细胞凋亡，保护线粒体的角度揭示地参结合酚对CCl4损伤肝细胞的保护作用机制，以期为地参功能食品的开发提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料、试剂与仪器

    地参，采于云南省剑川县沙溪镇；BRL 大鼠肝细胞，中国科学院细胞库；Annexin V-FITC 细胞凋亡试剂盒、Caspase-3 活性测试盒、细胞MDA 测定试剂盒、总超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒、还原型谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒 ......