熊海涛，徐艺凤，徐承娥

    (1 陕西理工大学 陕西省催化基础与应用重点实验室 陕西汉中 723001 2 陕西理工大学化学与环境科学学院 陕西汉中 723001)

    作为一种生物功能组分，焦磷酸盐(Pyrophosphate，PPi)是三磷酸腺苷(ATP)及其它核苷酸的水解产物，在DNA 和RNA 的聚合反应与复制、部分酶促反应、能量传递、多种代谢等生命活动中扮演着重要角色，也可以作为临床诊断与治疗关节炎的一种潜在生物标志物[1-3]。PPi 是一种食品添加剂，可以提高蛋白质成膜的几率，改善肉制品的品质和口味，增加肉制品的渗透能力，在一定程度上抑制肉制品褪色和变质，并能增加肉制品的弹性[4]。而如果摄入过量的PPi 可使钙磷聚合物大量产生，进而导致血管发生钙化[5]，甚至致癌[6]。建立一种准确且灵敏的PPi 检测方法，对保证食品安全及临床诊断十分重要。

    目前，检测PPi 的方法主要有比色法[7-9]、色谱分析法[10-11]、荧光光度法[12-15]、生物发光法[16]、化学发光法[17-18]及电化学分析法[19-21]等。其中，荧光光度分析法具有操作简单，灵敏度与准确度较高等优点，受到较多关注。近些年，利用荧光光度法测定实际样品中PPi 含量的方法主要有两种[22]：1)设计并合成有机荧光探针，以选择性识别与检测PPi[23-24]；2)利用金属离子与合成的荧光探针及PPi 之间的竞争反应，以实现对少量PPi 的高灵敏检测[25]。然而，荧光探针大多需要特殊设计，而且合成过程较为复杂，分离繁琐、费时，成本较高，因此其应用受到一定的限制。

    本研究采用具有微弱荧光的茚三酮-过氧化氢混合体系为基底反应物，通过在基底液中加入具有催化活性的Cu2+，使体系的荧光强度增强。当体系中加入少量的PPi 后，基于Cu2+能与PPi 形成稳定的配离子，使催化体系的荧光强度降低，从而建立一种新型荧光光度法，以检测食品中焦磷酸盐含量。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    虾仁与带鱼样品均购自汉中市水产品市场。

    冰乙酸(99.5%)，天津市登峰化学试剂厂；无水乙酸钠，天津市化学试剂六厂；过氧化氢(30%)，成都市科龙化学品有限公司；焦磷酸钠，天津市同鑫化工厂；茚三酮，天津市大貌学试剂厂；硫酸铜，天津市天力化工有限公司。试验用水如无特别说明，均为超纯水，固体试剂均为分析纯级。

    乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH 5.5)；硫酸铜溶液(1.0×10-3mol/L)；H2O2(1.0 mol/L)；茚三酮溶液(1.0×10-2mol/L) ......