王玥，刘子琦，聂萌滋，姜 鑫，李鹏程，闫梦华，朴春红*，肖盛元

    (1 吉林农业大学食品科学与工程学院 长春130118 2 吉林农业大学中药材学院 长春130118 3 吉林农业大学教育部食药用菌工程研究中心 长春 130118)

    荞麦(Fagopyrum esculentum)含有抗糖尿病、降血脂、降血糖和抗氧化等多种生物活性，被普遍加工成食药用产品[1-5]。荞麦壳是荞麦生产中最多的副产物，占据荞麦质量的三分之一[6]，然而，其利用途径较少，大多作为废弃物被丢弃，没有得到充分的利用。研究发现，荞麦壳富含多种生物活性成分，如黄酮类化合物、荞麦糖醇、功能性蛋白、膳食纤维等[7-9]，是天然产物开发的重要资源。

    黄酮类化合物被广泛认为是荞麦壳中的主要活性成分，能够显著减轻糖尿病小鼠的胰岛素抵抗，改善脂质代谢紊乱[10]，并抑制晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products，AGEs)形成，可通过调节AGE-RAGE 信号通路保护糖尿病小鼠肾脏[11]。生物活性物质的分离纯化在功能性食品和医药行业至关重要，直接影响产品的品质和价格。目前黄酮类化合物的分离纯化方法包括萃取、大孔树脂、膜分离、高效液相色谱等[12-13]，存在纯化周期长、消耗大、成本高等缺点。金属离子络合法操作简单、快捷、成本低、周期短，在黄酮类化合物的分离纯化中具有良好的应用前景[14]。

    金属离子络合法分离纯化黄酮类化合物的原理是：在碱性条件下，黄酮类化合物上的羟基易质子化，配合强配位的氧原子以及合适的空间构型，与部分金属盐络合形成稳定的沉淀，从而与其它可溶性杂质分离，利用更强的金属螯合剂，如乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA-2Na)，将络合态黄酮类化合物转化为游离态黄酮类化合物，达到黄酮类化合物分离纯化的目的[15]。含5-羟基或邻羟基的黄酮类化合物可与铅、铁、铜、锌等多种金属阳离子形成络合物，然而，铅污染环境，铁、铜等氧化能力过强，会破坏黄酮类化合物的结构[16]。锌离子是人体必需的微量元素之一，微量存在不会危害人体健康。残留的锌离子一般以络合态存在，研究发现，络合态的锌离子同样具有抗氧化、抗癌、抗糖尿病等生物活性[17-18]。

    亚硝酸钠-三氯化铝(NaNO2-AlCl3)比色法和三氯化铝-乙酸盐(AlCl3-NaAC)比色法是用于总黄酮测定的主要化学方法，反应原理如图1 所示。前者是酚羟基位点，后者是3-羟基或5-羟基位点与铝离子发生显色反应[19]。由于植物提取物组成复杂，总黄酮的测定结果易受非黄酮类化合物的干扰 ......