杨艳歌，王 帅，2，李红娜，李 涛，吴占文，2，孙冬梅，袁 飞*

    (1 中国检验检疫科学研究院 国家市场监管重点实验室(食品质量与安全)北京100176 2 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院 黑龙江大庆 163000)

    沙门氏菌(Salmonella)是环境中广泛存在的一类食源性致病菌，能够引起人畜食物中毒[1]，引起肠道内疾病，表现为急性发热、腹痛、呕吐等症状[2]，也可导致败血症、脑膜炎的发生[3]。据报道，全球每年约有9 000 多万例的沙门氏菌感染事件[4]。我国现行的国标GB 29921-2021 《食品安全国家标准 预包装食品中致病菌限量》[5]中明确规定，肉制品、水产制品、即食蛋制品等食品中不得检出沙门氏菌。目前沙门氏菌的检测方法主要有培养法[6]、免疫分析法[7]、PCR 检测法[8]、芯片检测法[9]、质谱分析法[10]、光谱测定法等[11]。其中传统培养法耗时费力，PCR 法、芯片法、质谱光谱法等均需依赖精准控温的仪器、设备和专业的操作，不适合室外环境快速检测。

    酶促等温扩增技术(Enzymatic recombinase amplification，ERA)是我国自主研发的一种新型等温扩增技术，诞生时间较晚，其反应原理与RPA技术类似[12-13]，都是在37～42 ℃的常温环境下，重组酶与引物DNA 紧密结合的聚合物在模板DNA上搜索到完全匹配的互补序列，然后在单链DNA结合蛋白的帮助下打开DNA 双链结构，最后在DNA 聚合酶的作用下完成扩增产物的指数级扩增。目前关于ERA 技术的研究主要集中在病毒和临床疾病检测等方面。如曾宇晨等[14]建立了非洲猪瘟病毒B646L、EP402R、MGF505/360 基因ERA检测方法，并应用到临床样品的检测。Zhang 等[15]建立了一种检测猪圆环病毒3 型的ERACRISPR/Cas12a 方法。Yang 等[16]建立了一种鉴别猪流行性腹泻病毒PEDV 野生型的ERACRISPER/Cas12a 方法。Liu 等[17]使用ERA 试剂盒结合CRISPR 技术建立一种快速检测癌症细胞耐药基因FLT3-F691L 的方法，40 min 即可获得检测结果。Meng 等[18]基于ERA 试剂盒结合CRISPR技术建立便捷、即时的检测啤酒腐败菌的方法。然而，目前未见该技术在食源性致病菌快速检测中的报道。

    本研究将文献报道的沙门氏菌RPA 引物探针应用到ERA 快速检测体系，拟建立荧光法和显色法两种沙门氏菌ERA 可视化高效快速检测方法，旨在为沙门氏菌可视化快速检测提供技术参考 ......