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编号:1692848
miR-642a-3p 对藻蓝色素抑制非小细胞肺癌活性的调控作用
http://www.100md.com 2023年12月16日 中国食品学报 2023年第11期
克隆,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1藻蓝色素对miR-642a-3p表达的影响,2miR-642a-3p过表达效果在细胞中的验证,3miR-642a-3p过表
     李前程,郝 帅,李 爽,刘媛璞,李凡念,杨 起,张文静

    (老年营养与健康教育部重点实验室(北京工商大学)北京市食品添加剂工程技术研究中心北京工商大学食品与健康学院 北京 100048)

    近年来,肿瘤对于人类健康的威胁越来越明显[1],其发病率和死亡率呈阶梯式上升,特别是在我国,肺癌的发病率和死亡率居高不下[2],已经严重威胁到人们的健康生存。肺癌的治疗主要抑制是癌细胞的增殖和转移,因此靶向治疗成为研究热点[3]。藻蓝色素(Phycocyanin,PC)是存在于螺旋藻中的一种捕光色素蛋白复合体,也是一类重要的食品功能因子,具有抗癌[4]、抗氧化[5]、抗炎[6]以及抗肿瘤[7]等多种生理活性的天然活性物质,可以通过调节人体中多种酶的合成,抑制癌细胞的生长,被广泛应用于功能性食品、化妆品和医药等领域中。前期研究发现藻蓝色素具有抑制非小细胞肺癌细胞(Non-small cell lung cancer,NSCLC)生长、增殖、迁移以及侵袭等作用[8-10],然而具体调控机制尚不明确。

    microRNA(miRNA)是一类由22 bp 左右核苷酸组成的非编码小分子RNA,对细胞的增殖、迁移和分化等生理过程起重要的调控作用[11]。狄奕成等[12]发现miR-195-5p 能够促进IL-17 诱导的肺癌细胞增殖、迁移和侵袭过程。万启飞等[13]研究发现miR-142-3p 可靶向下游基因,从而抑制肺癌A549 细胞增殖。此外,有报道称miR-642a-3p 在NSCLC 中具有重要的调控作用[14]。为进一步探究miR-642a-3p 是否参与藻蓝色素抑制NSCLC 的过程,本研究以4 种典型的非小细胞肺癌细胞(A549、H1299、H460、LTEP-a2)为模型,通过干预miR-642a-3p 的表达水平,从细胞增殖、凋亡、迁移以及克隆形成等试验探索miR-642a-3p对细胞活性的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    1.1.1 细胞株 人类非小细胞肺癌H1299 细胞系、H460 细胞系、LTEP-a2 细胞系(以下简称“A2”)、A549 细胞系由本实验室(北京市食品添加剂工程技术研究中心)保存。

    1.1.2 试剂 胎牛血清,康源生物技术有限公司;实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative realtime polymerase chain reaction,qPCR)相关试剂,广州锐博生物技术有限公司、北京全式金生物技术有限公司;1%青霉素-链霉素 ......

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