徐慧倩，胡家杰，邓尚贵，缪文华

    (浙江海洋大学食品与药学学院 浙江舟山 316022)

    低温等离子体(Cold atmospheric plasma，CAP)作为物质的第4 态，主要是通过电场对气体进行电离产生等离子体，而其构成的主要物质为带电粒子，包括正、负离子，激发态分子和原子、自由基等物质[1]，它主要应用于医学技术[2]、环境保护[3]、食品保鲜[4]等领域。因其具有绿色无污染、杀菌功效好、安全且操作简便等优点而被人们认为具有良好的前景，是21 世纪可大力发展的新技术。气调包装(Modified atmosphere packaging，MAP)是一种通过置换包装盒里的气体来达到保鲜目的的技术，通常使用的填充气体有N2、CO2、O2和稀有气体等[5]。N2是一种惰性气体，主要用来置换氧气以此来减少需氧菌的生长，而CO2对细菌具有抑制作用，通过使细胞酸化而影响其代谢活动[6-7]。有研究表明，CO2在低温等离子体反应器中可以转化为CO 和O2[8]。

    荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)是一种需氧性的革兰氏阴性菌，通常存在于水产品、肉制品以及乳制品中[9]，会引起败血症或败血性休克等[10]。它们会产生胞外蛋白酶来分解水产品中的蛋白质，具有很强的生物膜形成能力，从而增加细菌对杀菌剂的抵抗力以及抗生素的耐药性[11]。虽然关于低温等离子体杀菌保鲜效果的研究已比较广泛，包括畜产品、水产品、果蔬生鲜等，但是对于CAP 在气调环境下杀菌的致死机理有待研究深入。本文采用正交试验选定处理电压为50 kV，气调气体体积比为V(N2)∶V(CO2)=3 ∶2，在此条件下通过改变CAP 处理时间(0，60，180，300 s)对荧光假单胞菌的抑菌机理进行研究，为低温等离子体协同气调包装的杀菌保鲜方式应用于食品等提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    1.1.1 材料 荧光假单胞菌，分离自舟山带鱼中，经初步形态学观察和镜检后通过16S rDNA 鉴定为荧光假单胞菌(相似度为99.93%)，冻存于-80℃冰箱中。

    1.1.2 试剂 氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾，国药集团化学试剂公司；胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)、胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)，青岛海博生物科技有限公司；CCK-8 试剂盒，上海碧云天生物技术有限公司；碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，AKP)试剂盒、Na+/K+-ATPase(ATP)酶试剂盒、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase ......