张 栋，冯丽莉，荀一萍，薛玉玲，宁一冰，王世杰

    (君乐宝乳业集团股份有限公司 石家庄 050221)

    双歧杆菌由法国巴斯德研究所的Tissier 于1900 年从母乳喂养的婴儿粪便中首次分离得到[1]。随着研究的深入，双歧杆菌已成为众所周知的一类益生菌，具有调节肠道菌群[2-4]、抗肿瘤[5-7]、降胆固醇[8-9]以及延缓衰老[10-11]等功能性。另外，双歧杆菌已成为评价肠道菌群健康的重要参考指标。尤其在生命早期的婴儿肠道菌群中，双歧杆菌的种类和相对丰度对婴儿健康和后期成长都有重要作用[12-13]。在益生菌开发中，一般认为健康人体，特别是健康婴儿肠道样本是理想的益生菌来源。日本科学家就根据其不同寄宿环境将双歧杆菌分为人类亲和型双歧杆菌(Human-residential bifidobacteria，HRB)和非人类亲和型双歧杆菌(Nonhuman-residential bifidobacteria，NHRB)[14]。常见的HRB 包括长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum subsp.longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longum subsp.infantis)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。研究表明HRB 由于能够更好地利用母乳低聚糖并耐受溶菌酶，因此HRB 具有更好的肠道定植能力，是更适合人体尤其是婴幼儿的益生菌[15-18]。

    我国对于双歧杆菌的研究和开发较晚。市售益生菌酸奶中的双歧杆菌以欧美和日本厂商开发的少数几种菌株为主，限制了益生菌酸奶产品开发的多样性，也无法满足消费者对于益生菌酸奶的需求。

    本试验从健康婴儿粪便样品中分离得到1 株疑似双歧杆菌，对其进行分子生物学鉴定，研究其消化液耐受能力、免疫调节作用以及发酵特性，以期为我国益生菌发酵乳提供优良的双歧杆菌，为我国自有双歧杆菌的应用提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    婴幼儿粪便：君乐宝乳业集团收集的健康顺产婴儿新鲜粪便样品，于-80 ℃冰箱备用。

    1.2 试剂与仪器

    API50 试剂盒，法国梅里埃；莫匹罗星锂盐配套试剂、天根细菌DNA 提取试剂盒、蛋白胨、牛肉膏、琼脂粉等均为生物纯级，北京陆桥技术股份有限公司；葡萄糖、KH2PO4等均为分析纯级，石家庄现代仪器仪表化工有限公司；脱脂乳粉，雀巢(中国)有限公司；THP-1 细胞、细胞总RNA 提取试剂盒、反转录试剂盒、PCR 及电泳所用试剂 ......