基于链置换扩增的电化学适配体生物传感器检测食品中的赭曲霉毒素A
探针,特异性,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3试验方法,2结果与分析,1试验可行性验证,2修饰电极的表征,3电化学适配体传感器灵敏度和检出限,4传感器特异性,5传感器重复性及稳定性,6
刘 伟,张蕴哲,杨 倩,范少华,田益玲,张 伟,4,5*(1 河北农业大学食品科技学院 河北保定071000 2 河北大学公共卫生学院 河北保定071000 3 河北软件职业技术学院 河北保定071000 4 河北农业大学生命科学学院 河北保定071000 5 河北省人畜共患病原微生物分析与防控重点实验室 河北保定 071000)
赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)主要是由曲霉属和青霉属产生的次级代谢产物,常见于咖啡、小麦粉、葡萄酒、乳制品和水果等日常食品和食品原材料中[1-3]。OTA 理化性质较稳定,不易清除,对人类的肾、肝和脑等重要器官具有强烈毒性[4-5]。国际癌症研究机构(International agency for research on cancer,IARC)于1993 年将OTA归类为可能的人类致癌物2B 组[6]。
传统检测OTA 的方法包括:高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)[7]、气相色谱与质谱联用(Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)[8]和薄层色谱(Thin-layer chromatography,TLC)[9]等色谱方法。其中高效液相色谱法具有高灵敏度,是检测OTA 的主要方法之一。然而,其存在耗时长,设备昂贵,需要专业人员和大量试剂[10]等不足。传统的酶联免疫分析方法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)具有检测时间较短的优点,然而其存在检出限较高,所需抗原抗体合成价格昂贵,试剂需要冷藏保存,不适宜运输[11]等不足。而生物传感器作为一种成本低廉的快速检测手段,有望完善这些缺点[12]。
在OTA 特异性识别方面,传统方法将抗体作为分子识别工具[13],在食品分析中发挥至关重要的作用。这些基于蛋白质的抗体通常在动物体内产生,导致其相对复杂的生产过程和昂贵的价格[14]。相比之下核酸适配体的获取比传统抗体更方便[15],显示出许多优点,例如批次间变异低,免疫原性低,易用纳米材料或有机染料分子进行修饰等[16-17]。人们开始将核酸适配体作为识别分子来替代抗体的作用[18]。近些年,链置换扩增(Strand displacement amplification,SDA)技术成为研究热点,SDA 不需要精确控制温度,可以与各种信号分子结合,增加其使用范围[1]。同时电化学生物传感器技术是公认的应用范围广、成本低的生物传感器 ......
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