杨 浩，徐 慧，李欣妍，卢 鑫，杨 倩，张 伟，3，4*

    (1 河北农业大学食品科技学院 河北保定071000 2 河北农业大学理工系 河北沧州061100 3 河北农业大学生命科学学院 河北保定071000 4 河北省人畜共患病原微生物分析与防控重点实验室 河北保定071000 5 河北大学公共卫生学院 河北保定 071000)

    蜂蜜是蜜蜂从各种植物分泌物中酿造产生的天然甜味物质，具有较高的营养价值和良好的感官性能[1]。随着国内外对蜂蜜需求量日益增加，蜂蜜的市场供不应求[2]。在巨大的利益驱动下导致其掺伪现象严重[3]。这不仅损坏消费者利益，而且沉重打击了合规蜂企和蜂农的利益。目前市场中约有90%的蜂蜜掺伪与甜味剂有关，最常见的为大米糖浆[4]。由于蜂蜜掺伪鉴别难度大，现有的检测技术很难做到简便、快速的鉴别[4-5]，且国内外对于蜂蜜掺伪的检测标准并不完善，因此，开发一种简单、快速的检测蜂蜜掺伪方法成为研究热点。

    近年来，许多分析技术被用于蜂蜜的真实性检测[6-7]。核磁共振法(Nuclear magnetic resonance，NMR)被认为是最有效的方法之一[8]，然而其成本高，耗时长。气相色谱-质谱(Gas chromatographymass spectrometry，GC-MS)[9]、高效液相色谱(High performance liquid chromatography，HPLC)[10]这些方法在应用于热处理食品检测时存在一定局限，且步骤繁琐，不能满足快速检测要求。近红外光谱技术(Near infra-red spectroscopy，NIRS)[11-13]、傅里叶变换拉曼光谱(Fourier transform-Raman spectroscopy，FTRS)[14-15]、稳定性碳同位素质谱(Stable carbon isotope mass spectrometry，SCIMS)[16]等技术都需要专业的操作人员，限制了其在常规检测中的应用。基于DNA 检测的聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction，PCR)、实时荧光定量PCR 已在蜂蜜掺伪检测中得到应用。如Sobrino-Gregorio 等[17]通过实时PCR 定量检测蜂蜜掺伪大米糖浆的相对灵敏度为2%～5%，灵敏度高，特异性良好，然而反应需要复杂的变温过程。随着分子生物学技术的发展，核酸等温扩增技术发展迅速。

    本研究团队基于Bst 酶扩增DNA 的一个新特性，创建了跨越式滚环等温扩增技术，其原理如图1 所示 ......