任春慧 冯 晨 李婉玉 方 超 毛艺纯 冯 华*

    (1.牡丹江医学院附属红旗医院核磁共振科，黑龙江 牡丹江，157011；2.牡丹江医学院附属红旗医院骨外一科，黑龙江 牡丹江,157011；3.牡丹江医学院病理生理学教研室，黑龙江 牡丹江，157011)

    卵巢癌(ovarian cancer，OC)是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一。约80%患者就诊时已处于晚期。其常规治疗方法是手术切除联合化疗药物，但预后并不十分理想[1-2]。高良姜素(Galangin，GLA)是中药高良姜的主要活性成分，其不仅具有抗炎、抗氧化、降血脂等作用，而且表现出一定的抗癌活性[3-5]。有研究表明PI3K/AKT信号通路是肿瘤细胞内最重要的信号转导通路之一，在肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、细胞周期进程及血管形成中发挥着重要作用[6-8]。本研究以GLA为研究对象，旨在探讨GLA是否对卵巢癌A2780细胞增殖、迁移以及凋亡能力产生影响，以及是否通过PI3K/AKT信号通路产生抑癌作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂

    GLA(G100561)，相对分子量270.24(MW)，纯度>98%，购自上海阿拉丁生物科技有限公司。卵巢癌A2780细胞购自 武 汉procell公 司；GAPDH(WL01114)、AKT(WL0003b)、p-AKT(Ser473)(WLP001a)、Bcl-2(WL01556)和Bax(WL01637)抗体(万类生物，沈阳)；CCK-8试剂盒(博士德，武汉)；BCA蛋白定量试剂盒(北京普利莱基因技术有限公司)；TUNEL细胞凋亡试剂盒(碧云天，武汉)；流式凋亡检测试剂盒(万类生物，沈阳)。

    1.1.2 仪器设备

    酶标仪(生产企业：Molecular Devices公司，型号：SpectraMax 190)；荧光正置式生物显微镜(生产企业：日本尼康公司，型号：Eclipse Ci-L)；流式细胞仪(生产企业：美国BD公司，型号：Accuri C6)；CO2恒温细胞培养箱(生产企业：日本三洋公司，型号：MCO-20AIC)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养

    将卵巢癌A2780细胞加入含10%胎牛血清、1%青霉素和链霉素的RPMI 1640培养基中，置于37℃、5% CO2的培养箱培养，根据细胞生长情况，隔天换液，镜下观察细胞密度达到70%～80%时可以进行传代。细胞每隔2～3天传代一次 ......