1.3 树突状细胞表型测定：收集细胞，浓度调整为2×105/ml，分别加入CD86_FITC、 CD83_PE、HLA_DR、CD1a_PE抗体各5ul，LPS组加入2种同型对照各10ul，常温避光孵育20mi n；用生理盐水洗细胞2次，最后用200ul的生理盐水重悬；用FACSCalibur检测各管细胞中各 种抗体阳性的细胞比率及平均荧光强度(MFI)；用CellQuest软件分析。

    1.4 混合淋巴细胞反应：分离人外周血单核细胞，用T淋巴细胞柱分离出T淋巴细胞， 用含10%FBS的RPMI 1640培养基重悬，以2×106/ml的密度种入圆底96孔板，每孔100ul； 经ADMA干预的mDC，加入25ug/ml的丝裂霉素C孵育1h；DC细胞悬液以与T淋巴细胞1∶10的比 例加入100ul；五天后加入20ul MTT再培养4h；弃去上清，加入150ul DMSO；用酶标仪在波 长570nm处读数。

    1.5 DC凋亡的检测：收集细胞总量约1～5×105，重悬于500ul的Binding Buffer，再加 入5ul Annexin V_FITC和5ul Propidium Iodide充分混匀，室温、避光、反应5～15min，并 在1h内，进行流式细胞仪检测；用CellQuest软件分析。

    1.6 ELISA法检测血清中IL_12、IL_10和TNF_α的浓度：ELISA法分别检测保存的培养细胞 上清中IL_12、IL_10和TNF_α的浓度 ......