龙葵碱对小鼠睾丸生殖细胞线粒体氧化应激的影响(2)
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1、材料与方法
1.1 实验动物及分组
20只雄性小鼠，体重20～24g。 随机分成4组，每组5只。采用腹腔注射对小鼠进行染毒，龙葵碱染毒剂量分别是5.25mg/kg；21 mg/kg。另设阴性对照组(生理盐水组)，阳性对照组(环磷酰胺，CP， 40mg/kg)，龙葵碱不同浓度组连续染毒14天，每天上午9点腹腔注射一次。环磷酰胺组采用30h 染毒法，即2次染毒间隔24h，于第二次染毒后6h 将小鼠脱颈椎处死，实验组于末次染毒后禁食、自由饮水，24h内进行实验。
1.2 实验材料
昆明种健康级小白鼠，由哈尔滨汉方试验鼠类养殖所提供(00101006)。紫外可见分光光度计(尤尼柯 UV-210)；低速离心机(北京医用离心机厂 LD4-2A)；电子天平(德国 Bs型)；电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司)；超细匀浆器(德国FLUKU F6/10)；涡旋震荡器(江苏海门麒麟医用仪器厂)。龙葵碱(天津市化学试剂分厂六厂，体积分数为95%)；流式细胞仪；200目不锈钢网；蛋白定量(考马斯亮兰法)测试盒(南京建成生物工程研究所)；SDH试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.3单细胞悬液的制备和睾丸组织样品的处理
将各染毒组小鼠的睾丸取出以适量的生理盐水洗涤后，在消毒碟皿中将组织剪切成碎块.移入2 mL含0·25%胰蛋白酶的磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer solution ......
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