黄浴日 向凯乐 饶立荣

    邵阳学院 湖南省邵阳市 422000

    肺炎支原体渗透压诱导蛋白C的分子生物克隆及生物活性分析

    黄浴日 向凯乐 饶立荣

    邵阳学院 湖南省邵阳市 422000

    目的：用生物克隆的方法表达肺炎支原体(Mycoplasmsa pneamoniae, Mp)渗透压诱导蛋白C(Osmotically inducible protein C, OsmC)并测定其生物活性活性。方法：根据Mp的OsmC基因序列设计特定引物，PCR扩增OsmC基因。通过构建重组质粒pET28a-MpOsmC，并转化入大肠埃希菌BL21(DE3)，来诱导目的蛋白表达。我们采用镍柱亲和层析法对OsmC蛋白进行纯化，再用氧化铁二甲酚橙试剂(FOX)测定OsmC蛋白的活性。结果：我们用生物克隆的方法得到Mp的OsmC基因片段，并成功构建重组质粒pET28a-MpOsmC。重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)后经过表达我们得到重组Mp OsmC蛋白，再经亲和层析得到高纯度的目的蛋白，且具有分解H2O2的活性。结论：重组Mp OsmC蛋白具有过氧化物酶的活性，为研究肺炎支原体的抗氧化机制提供了理论依据。

    肺炎支原体；渗透压诱导蛋白C；分子克隆；分子活性

    支原体是自然界中存在的最小的原核生物。这些无壁的，可塑的生物可以通过细胞过滤器，并在体外在无细胞条件下生长和繁殖。肺炎支原体(Mycoplasmsa pneamoniae, Mp)是被检出最多的支原体，除了引起非典型肺炎和社区获得性肺炎等主要呼吸道症状外，肺炎支原体还可能引起血液 ......