多花黄精活性多糖提取分离及含量测定研究
超纯水,药渣,水浴,1仪器,试剂与材料,2方法与结果,1葡萄糖标准储备液的配制,2多花黄精粗多糖样品的制备,3最大吸收波长的确定,4标准曲线的制备,5精密度试验,6稳定性试验,7重复性试验,8加样回收率试验,9多花黄精提
何连军 吕伟德 杨菊妹1杭州职业技术学院 浙江省杭州市 310018 2磐安县人民医院 浙江省金华市 322300
多花黄精活性多糖提取分离及含量测定研究
何连军1吕伟德1杨菊妹2
1杭州职业技术学院 浙江省杭州市 310018 2磐安县人民医院 浙江省金华市 322300
目的:对多花黄精活性多糖的提取分离方法进行试验,确定最佳的提取分离方法,并对提取分离后的粗多糖的含量进行测定。方法:采用超声辅助水浴提取,醇沉分离得到多花黄精粗多糖。以葡萄糖为标准品,在488nm波长处,采用苯酚-硫酸法对多糖的含量进行测定。结果:葡萄糖在20~100mg/L质量浓度范围内呈良好的线性关系(r>0.999),RSD为0.23%~1.51%,平均加样回收率为100.2%。测定结果表明,不同产地的多花黄精活性多糖含量存在较大的差异。结论:本实验所建立的方法简便快速,准确高,可用于多花黄精多糖提取分离及含量测定的分析研究。
多花黄精;多糖;苯酚-硫酸法;紫外-可见分光光度
黄精为百合科多年生草本植物,按形状不同,主要分为滇黄精、黄精和多花黄精等,习称“大黄精”、“鸡头黄精”、“姜形黄精” ,其中以多花黄精的质量最佳、药效最好[1]。多花黄精又名姜形黄精,属于黄精中的优质品种,中药取其干燥根茎入药,具有补气养阴、健脾、润肺、益肾等功效。黄精多糖是黄精重要的化学组成部分,是黄精的主要生物活性成分。
目前,植物多糖含量测定方法尚无统一标准,常用的方法有滴定法、分光光度法(UV-Vis)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、高效毛细管电泳(HPCE)、高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)[2]等。多糖含量测定最经典的方法是滴定法和分光光度法,其他方法主要用于测定多糖水解后单糖的组成。黄精多糖的提取方法有热水浸提法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法、减压内部沸腾法等[3],其中最常用的是热水浸提法。
本实验对多花黄精活性多糖的提取分离方法进行了研究,确定了最佳的提取分离条件。并以葡萄糖为标准品,采用苯酚-硫酸法对多糖的含量进行测定。结果表明,该方法简便快速,准确度高,可作为多花黄精活性多糖提取分离及含量测定的分析研究。
1 仪器、试剂与材料
UV-1800紫外-可见分光光度计;DFY-500摇摆式高速中药粉碎机;AR223CN电子天平;HP550-S数显电加热板;SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵;TGL-16M台式高速冷冻离心机;DZF-6050MBE真空干燥箱;DHG型电热恒温鼓风干燥箱;RE-52AA旋转蒸发器;KQ3200E超声波清洗器;旋涡振荡器;明澈-D 24UV纯水/超纯水一体化系统 ......
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