大肠杆菌中质粒DNA大量提取条件的优化
【摘要】应用碱裂解法原理大量提取大肠杆菌中的质粒DNA,对质粒提取试剂盒的相关步骤进行了优化。结果显示按优化的步骤该方法提取的质粒DNA浓度高、质量好,能够符合后续酶切等常规实验的要求。【关键词】质粒DNA;碱裂解法;大肠杆菌
质粒是闭合环状的DNA分子,存在于细菌、酵母菌和放线菌等生物的染色体并表达所携带的遗传信息,常被用做基因工程中的载体。在质粒中插入目的基因片段,构成重组质粒或称重组体,然后将重新构建的重组质粒经过电击法、CaCl2等化学试剂法处理转化,转入受体细菌(如大肠杆菌)中,使目的基因在受体菌中得以繁殖或表达。通过对试剂盒提取质粒的步骤中进行优化,经过DNA浓度测量发现以优化步骤提取的质粒DNA质量和纯度较对照组更好,能更好地满足后续实验要求。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1菌株与质粒
重组质粒pVAXl-HA2-FimA/IL-15、pVAXl-HA2/IL一15由课组前期构建保存 ......
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