脂多糖诱导大鼠急性肺损伤时核因子-KB信号转导及盐酸氨溴索的作用(2)
心2min,使细胞碎片聚集成团;上清液含DNA结合蛋白,液氮速冻,-80℃下保存备用。1.5肺组织病理
腹腔注射Ns(A、B组)或LPS(C、D、E、F组)后4h处死动物,取肺脏浸泡于10%福尔马林溶液中,分离肺叶,矢状切开,石蜡包埋,制成μm厚切片,HE染色。
1.6检测方法与指标
1.6.1酶联吸附免疫法(ELISA) 以ELISA测定BALF中肿瘤坏死因子.-a(TNF-a)、白介素.1J3(IL-1p)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)浓度,操作步骤均按试剂盒说明书进行。
1.6.2蛋白印迹法(Western blot) 以Western blot检测肺组织细胞NF-xB p65、IxBa与磷酸化JNK的表达,操作均参照抗体说明书进行,并重复3次。以凝胶图像分析系统(Bio-Rad公司,美国)测定目标带灰度值。
1.6.3光镜下观察肺组织病理形态学变化。
1.7统计学方法
采用SPSSl3.0统计软件包处理。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,多组间比较用方差分析,组间两两比较采用q检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 BALF中LDH、总蛋白含量的比较
在相同时间点A组与B组之间LDH差异无统计学意义(P>0.05);与A组比较 ......
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