冯东福 卢亦成 楼美清 陈二涛 汪 洋 李文生

    [摘要] 目的 探讨大鼠视神经离断对神经干细胞一上丘组织共培养诱导分化的影响。方法采用机械分离，无血清选择培养的方法从孕14d的胚鼠上丘中获取神经干细胞并进行传代培养。使用免疫荧光技术对神经干细胞进行鉴定。采用显微手术的方法建立大鼠视神经离断模型，分别取正常大鼠、假手术和视神经离断大鼠的上丘组织进行体外培养。使用组织一细胞共培养系统将大鼠上丘组织与神经干细胞共培养，观察干细胞分化过程，对分化细胞进行鉴定，并与干细胞的自然分化过程进行比较。结果从胚鼠上丘中获得的细胞在无血清培养条件下聚集呈球形悬浮生长，可形成单细胞克隆，具有多向分化能力，经免疫荧光鉴定证实为神经干细胞。视神经离断大鼠的上丘组织与胚胎上丘源神经干细胞共培养可以促进神经干细胞的分化，并诱导分化出Thyl.1阳性的视网膜神经节细胞。结论从胚胎大鼠上丘可以分离培养出神经干细胞，与视神经离断大鼠的上丘组织共培养可以诱导上丘源神经干细胞分化为视网膜神经节细胞。

    [关键词]干细胞；组织培养；视网膜神经节细胞；细胞分化；视神经损伤往往与损伤后的微环境信号有关。上丘对RGCs的轴突生长具有诱向作用，同时对其分化成熟也有重要作用。但视神经离断后大鼠上丘组织在体外环境下对NSCS分化的影响目前还未见报道 ......