多器官功能障碍综合征大鼠肾组织细胞外基质损伤(3)
1.7 western印迹技术检测肾组织中MMP-9
及Ⅳ型胶原的蛋白水平 应用western印迹技术检测肾组织中MMP-9及Ⅳ型胶原的蛋白表达。组织块用冷TBS洗涤2~3次,去除血污,剪成小块置于匀浆器。加入10倍组织体积组织裂解液体,提取组织总蛋白溶液, 采用Bradford方法进行蛋白定量。制备分离胶进行电泳,每孔加入蛋白含量约20 μg,8%质量浓度的SDS-PAGE电泳后PVDF转膜。5%脱脂奶室温封闭1 h后加入一抗(1∶ 200稀释),4℃摇床过夜,用TBST室温下脱色摇床下洗涤3次,再加入生物素标记的二抗(1∶ 3000),摇床常温孵育1 h , TBST洗涤,ECL发光,X线底片曝光, 显影及定影, 条带的灰度值以β-actin作为内参。对电泳条带扫描及图像分析,重复3次后得出条带的平均吸光度(A)分析。
1.8 统计学方法
所有数据采用SPSS 17.0软件包进行统计分析,计量数据用均数±标准差(x±s)表示,先进行数据的正态分布检验(Kolmogorov-Smirnov),方差齐性检验,组间比较采用单因素方差分析(SNK-q法),以P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 各组大鼠基本情况
对照组大鼠无死亡,MODS模型组12 h死亡2只,24 h死亡3只,48 h死亡1只。对照组活动如常 ......
您现在查看是摘要页,全文长 5433 字符。
闂勬劒绨張宥呭閸c劌甯囬崝娑崇礉缂冩垹鐝柈銊ュ瀻娣団剝浼呴崣顏冪返閻栧崬绺炬导姘喅閹存牗婀佹稉鈧€规氨袧閸掑棛娈戝▔銊ュ斀娴兼艾鎲冲ù浣筋潔閵嗭拷
濮濓拷娣団剝浼�闂団偓鐟曪拷 2 缁夘垰鍨庨敍鍫濆帳鐠愯鏁為崘宀€娅ヨぐ鏇炴倵濮e繐銇夐崣顖欎簰妫板棗褰�10娑擃亞袧閸掞拷閿涘鈧拷
用户名: |
|
密 码: |
|
忘了密码 |
如果您还不是100md.com会员,欢迎 免费注册,
如果您想获得积分,点击这里 查看积分规则。
如果您想订购杂志,请直接与《中华急诊医学杂志》编辑部联系。
微信文章
关注百拇
评论几句
搜索更多
|