1.6Western blot 检测Sprouty1蛋白的表达

    分选出的CD4+T淋巴细胞中加入100 μl 蛋白裂解液混匀，然后在4 ℃下12 000 r/min离心20 min，提取上清转移至新离心管中，然后用BCA法检测蛋白浓度，内参为GAPDH。配置12%分离胶和5%浓缩胶，进行SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳，半干法转膜40 min，用TBST配置的5%脱脂奶粉封闭1 h，1∶2500一抗4 ℃敷育过夜，脱色摇床上用TBST洗膜5 min×5次，1∶5000红外荧光二抗室温敷育2 h后在双色红外激光成像系统扫描成像。

    1.7ELISA 检测IL-2质量浓度

    将收集的血清标本及培养基上清和ELISA试剂盒常温下放置约30 min，操作步骤按说明书进行。

    1.8统计学方法

    采用SPSS 13.0统计软件对实验数据进行分析，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，两组间比较采用成组t检验，多组间比较采用方差分析(ANOVA分析) ......