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编号:12669467
急性肺损伤大鼠肺组织神经导向因子Slit2及Robo4的表达(3)
http://www.100md.com 2014年3月1日 中华急诊医学杂志 2014年第3期
     1.3.5 肺组织中Slit2及Robo4免疫组化观察 采用过氧化物酶标记的链霉卵白素法(SP法),将肺组织石蜡包埋、切片,常规脱蜡,磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗,3%H2O2溶液消除内源性过氧化物酶,胰蛋白酶修复后,正常兔血清封闭非特异性抗原,各自滴加1∶500羊抗大鼠Slit2抗体及1∶500羊抗大鼠Robo4抗体,2 ℃过夜。PBS漂洗后滴加辣根过氧化物酶标记的兔抗羊二抗,37 ℃孵育30 min PBS漂洗后3,3’-二氨基联苯胺(DAB)显色,苏木素复染,脱水、透明、封片,光镜下观察,以细胞核呈棕黄色染色为阳性细胞。将免疫组化染色结果进行显微照相后,每张切片随机选取5个视野,采用图像分析系统检测出每个视野的A值和面积,得出其单位面积的平均A值,作为该样本的染色强度。

    1.4 统计学方法

    使用SPSS 13.0统计软件进行分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。

    2 结果

    2.1 PaO2、肺毛细血管通透性、肺W/D比、血清TNF-α质量浓度

    与对照组相比 ......
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