1.2.3设计25μL PCR体系各试剂配比 (1)用移液枪吸取上下游引物各1μL加入到薄壁管内;(2)用移液枪吸取2×Taq PCR Mix 12.5μL加入到薄壁管内;(3)用移液枪吸取模板(核酸DNA)1μL加入到薄壁管内;(4)用移液枪吸取ddH2O 9.5μL，补齐至25μL。

    1.2.4设置对照 (1)用移液枪吸取上下游引物各1μL加入到薄壁管内;(2)用移液枪吸取2×Taq PCR Mix 12.5μL加入到薄壁管内;(3)用移液枪吸取无菌水 1μL加入到薄壁管内;(4)用移液枪吸取ddH2O 9.5μL，补齐至25μL。注：为方便区分实验组和对照组应在薄壁管的侧壁及盖子上用记号笔写上编号。

    1.2.5扩增 打开PCR扩增仪(BIO-RAD T100 型)，按照默认的预定程序进行设置操作，将上述含有模板DNA的反应体系和对照组放入PCR仪内。具体程序如下：(1) 95℃ 3min进行预变性;(2)95℃ 30s进行变性;(3)55℃ 30s进行退火;(4)72℃ 1min进行延伸;(5)循环(2)(3)(4)步骤35次;(6)再次进行72℃延伸 ......