景 涛, 刘建平, 苗 莉, 冯 健, 冉擘力, 王海东, 何国祥*

    AT2R基因在体可调控表达对大鼠血管损伤后MMP-2表达的影响

    景 涛1, 刘建平1, 苗 莉1, 冯 健2, 冉擘力1, 王海东3, 何国祥1*

    (第三军医大学西南医院:1心内科,3胸心外科, 重庆 400038;2泸州医学院附属医院心内科, 泸州 646000)

    研究间充质干细胞(MSCs)移植实现血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因在体可调控表达对大鼠颈动脉损伤后新生内膜中基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响。采用常规分子生物学方法连续两个回合转染体外培养的MSCs，获得受到强力霉素(Dox)调控的低背景、高诱导表达AT2R基因的双重稳定MSCs系；建立大鼠颈动脉球囊损伤动物模型，将双重稳定MSCs系种植于动脉损伤局部，通过尾静脉注射Dox，分别于术后14、28d行病理切片，采用免疫印迹、免疫组化法及RT-PCR等技术检测AT2R基因在新生内膜中的表达及其对MMP-2表达的影响。成功建立了低背景、高诱导表达AT2R基因的双重稳定MSCs系。该MSCs系受到Dox给予/去除的紧密调控，诱导后48h即可使AT2R显著表达，在Dox干预72h后AT2R表达进一步增强；这种表达的可诱导性至少在8周内维持稳定。免疫印迹、免疫组化及RT-PCR检测显示：球囊损伤大鼠血管后14d及28d，Dox组新生内膜中AT2R的表达显著高于对照组、MSC组、MSC转染组(<0.01)；同时，Dox组新生内膜中MMP-2阳性染色较对照组、MSC组和MSC转染组显著减弱(<0.01)。血管损伤局部导入双重稳定MSCs系后AT2R表达受到Dox的良好调控。Dox诱导AT2R表达后，新生内膜中MMP-2表达减少，可能是MSCs细胞移植实现AT2R基因在体可调控表达有效抑制新生内膜增生的机制之一。

    血管紧张素Ⅱ2型受体; 可调控表达; 间充质干细胞; 新生内膜增生; 基质金属蛋白酶

    血管内皮损伤后中层血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)的迁移、过度增殖及细胞外基质(extracellular matrix，ECM)合成增加是血管成形术后再狭窄发生的基本病理生理基础，因此，有效抑制VSMCs的迁移、增殖及ECM增加是预防再狭窄发生的研究焦点[1]。有研究显示[2-4]，血管损伤后，骨髓中的间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)黏附于损伤的血管局部，并进一步分化为VSMCs和内皮细胞 ......