吴 强, 黄 晶, 宋 方, 龙向淑

    干扰素-α对人血管成纤维细胞迁移的影响

    吴 强*, 黄 晶, 宋 方, 龙向淑

    (贵州省人民医院心内科, 贵阳 550002)

    探讨干扰素-α(IFN-α)对人脑血管外膜成纤维细胞(VAFs)迁移的影响及机制。培养人脑VAFs，用终浓度为2000kU/L的IFN-α刺激24h(IFN-α组)，用细胞划线法与Tanswell法检测细胞迁移能力变化，用Real-time PCR法和蛋白免疫印迹(Western blotting)法分别检测细胞中干扰素诱导蛋白16在mRNA和蛋白表达水平的变化。以空白组为对照。与空白组比较，IFN-α组VAFs的干扰素诱导蛋白16的mRNA和蛋白表达水平上调，细胞迁移受限。IFN-α可抑制VAFs迁移，该效应可能与促进干扰素诱导蛋白16表达有关。

    干扰素α; 成纤维细胞; 迁移; 干扰素诱导蛋白

    血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts，VAFs)是动脉管壁成分细胞之一，近年研究发现VAFs的增殖、表型转化、迁移及分泌细胞外基质等变化参与了血管增殖性疾病的病理改变，在血管重构过程中起着重要的作用[1-3]。干扰素(interferon，IFN)是一组具有抗病毒、抗增殖、影响细胞生长和分化等作用的细胞因子，通过诱导表达多种IFN诱导蛋白发挥其生物学效应[4]。本文应用IFN-α刺激人脑VAFs，检测其迁移和IFN诱导蛋白16(intreferon-inducible protein，IFI16)表达的变化，旨在探讨IFN-α对VAFs迁移的影响及机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    人脑VAFs细胞株购自ScienCell公司；IFN-α购自北京三元基因工程有限公司；逆转录试剂盒购自Fermentas公司；人IFI16引物(上游：gaagtgccagcgtaactccta，下游：tacctcaaacaccccattcac，80bp)和人β-actin引物(上游：tggcaccacaccttctacaatg，下游：tcatcttctcgcggttggc，103bp)购自上海生工生物工程公司；Real-time PCR荧光染料试剂盒购自TakaRa公司；Transwell小室购自Corning公司。

    1.2 VAFs的培养

    将冻存的VAFs复苏后移入15ml离心管，加入10倍体积的10%胎牛血清DMEM培养基 ......