冯 健, 何国祥, 刘建平, 景 涛

    激动网织红核因子相关因子2对大鼠氧化应激所致血管平滑肌细胞损伤的影响

    冯 健, 何国祥*, 刘建平, 景 涛

    (第三军医大学附属西南医院心血管内科, 重庆 400038)

    探讨激动网织红核因子相关因子2(Nrf2)对氧化应激诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)损伤的影响。原代培养大鼠VSMCs，随机分为4组：对照组、氧化损伤组、Nrf2激动剂组、Nrf2干扰慢病毒组。Western免疫印迹法检测Nrf2蛋白表达变化，MTT法检测各组细胞活力，Hoechst 33342法及Annexin V/FITC法检测各组细胞凋亡情况。荧光显微镜显示，Nrf2干扰慢病毒成功感染VSMCs；Western免疫印迹检测显示，Nrf2干扰慢病毒感染细胞后，Nrf2蛋白表达与对照组比较显著降低(<0.05)。与氧化损伤组比较，Nrf2激动剂组VSMCs活力显著增加(<0.05)，细胞凋亡显著降低(<0.05)；而Nrf2干扰慢病毒组VSMCs活力显著减弱(<0.05)，细胞凋亡明显增加(<0.05)。激动Nrf2能减轻氧化应激引起的VSMCs损伤，这可为VSMCs损伤的防治提出新的研究方向。

    网织红核因子相关因子2; 氧化应激; 血管平滑肌细胞

    动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)及其相关疾病的发生发展与血管老化有着密切的联系。氧化应激参与了血管老化并在血管老化中扮演着重要的角色。减轻血管细胞氧化应激损伤，对延缓细胞衰老，防治AS的发生有重要意义[1,2]。网织红核因子相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2)是近来发现的调控细胞内氧化应激的主要转录因子。因此，本研究以血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)为研究对象，观察激动Nrf2对氧化应激导致VSMCs损伤的影响，以期为VSMCs损伤的防治提出新的研究方向。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    出生3～4周的清洁级Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠，购于第三军医大学实验动物中心；齐墩果酸(美国Sigma公司)；胎牛血清、达尔伯克改良伊格尔培养液(美国Gibco公司)；Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒(北京四正柏生物科技有限公司)；Hoechst 33342(碧云天生物技术研究所)；Western blot化学发光检测试剂盒(美国 Amersham公司)；其他试剂为国产分析纯或进口分装 ......