石 卉, 吴本俨, 王昌正, 王卫华, 刘文徽

    (解放军总医院南楼临床部消化内科, 北京 100853)

    急性肠缺血(acute mesenteric ischemia，AMI)时由于急性的肠壁动脉血供不足或静脉回流障碍，从而引起肠壁的营养障碍或运动障碍，其主要并发症为肠管节段性坏死[1]。该病起病急骤，早期症状、体征不典型，误诊率及病死率较高，尚缺少特异性生物标志物[2]，当出现明显的腹膜炎体征以及特异性影像学表现时，病情往往已经进入晚期，其临床表现为肠管坏死、中毒性休克、多器官功能衰竭等，严重危及患者生命。尽管其在诊断技术和治疗方法已有一些进展，但急性肠缺血的死亡率仍高达60%～80%[2]，误诊率达80%～95%[3]。本研究旨在探索大鼠急性肠缺血模型血清肠脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein，I-FABP)和D-乳酸(D-lactate，D-Lac)浓度与缺血时间、肠黏膜损伤的相关性，以期为急性肠缺血早期血清标志物提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和仪器

    抗I-FABP单克隆抗体(Sigma公司，美国)，D-Lac测定试剂盒(嘉美生物，中国)，ELISA免疫试剂盒(Cayman chemical，美国)，酶标仪(DENLEY DRAGON Wellscan MK 3，芬兰)，分析软件(Ascent software for Multiskan)，离心机(TGL-168)。

    1.2 实验动物和分组

    健康成年雄性Wistar大鼠60只(250～300g)，购于解放军总医院动物实验中心。标准饲料饲养，大鼠自由摄食和饮水。在进行实验前，大鼠最少饲养1周以适应实验室环境。采用随机数字表法，将大鼠随机分为6组：假手术组(空白对照)、缺血30min组、缺血60min组、缺血90min组、缺血120min组、缺血150min组，每组10只。

    1.3 动物造模

    手术前实验动物禁食24h，自由饮水。手术当日，大鼠称重后，10%水合氯醛(5mg/kg)腹腔注射麻醉。麻醉成功后，大鼠取背卧位固定于解剖垫，腹部手术区备皮，碘伏消毒。取腹部正中切口，长3～4cm，逐层剪开腹壁各层进入腹腔。将小肠向左侧外置于温生理盐水浸湿的无菌纱布垫上，显露肠系膜前动脉，在其主动脉起源处向远端钝性分离出1～2cm，靠近其根部用一个无创性微血管夹夹闭肠系膜前动脉，阻断血流 ......